活性肽构效关系的研究进展.ppt

活性肽构效关系的研究进展 目录 活性肽的定义 1 活性肽分离纯化和分析检验检测技术 5 活性肽的类别 2 活性肽的制备方法 3 活性肽构效关系 4 活性肽的定义 1 生物活性肽是一类源于生物且具有不同生物活性的产物。一般由几个到几十个氨基酸残基以酰胺键构成，氨基酸排列顺序各异、结构多样。现代研究表明，活性肽具有蛋白质及构成蛋白质的单一氨基酸所不具备的生理功能。这些肽生物活性多样,包括抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、心血管保护作用(抗高血压、抗动脉粥样化和抗凝血)、免疫调节、镇痛、抗焦虑等作用。 活性肽的类别 2 生物活性肽分布广泛, 多来源于动植物体。目前生物活性肽尚无一致的分类方法。 按原料来源：海洋生物活性肽和陆地生物活性肽 按分泌部位：内源性生物活性肽和外源性生物活性肽 按功能：生理活性肽，如：血管紧缩素转化酶（ACE）抑制肽，抗氧化肽、抗菌肽等；食品感官肽，如呈味肽、表面活性肽、营养肽等 活性肽的制备方法 3 3.1 直接提取法 直接提取法就是利用各种分离纯化技术，直接从自然界生物体中提取出各种生物活性肽。由于这些生物活性肽是生物体本身所含有的，并且在生物体中含量很低，如果要把这些活性肽从生物体中分离出来获得较高纯度的产物，必然要经过多次抽提和精炼步骤，这将造成很高的加工制造成本，故难以实现大规模工业化生产。另外，应用这种方法提取活性肽需要使用大量的有机溶剂，将造成对环境的污染，也将会导致所提取的生物活性肽中存在有机溶剂残留而带来毒性等问题。 3.2 人工合成法 人工合成生物活性肽的途径主要有三条:化学合成法、酶合成法和重组DNA技术。化学合成途径主要是固相合成法和液相合成法。常用于合成高活性、中等长度的医药用肽。酶合成法相对有很多优点, 如反应温和, 酶催化位置有方向性等, 但反应副产物多, 最适酶缺乏及产率过低等因素都制约着它的发展。而使用DNA 重组技术只能合成大分子肽类和蛋白质, 对人类主要需求的具有营养价值的小肽, 这种方法也不适用。 3.3 蛋白质降解法 蛋白质本身是生物活性肽的前体，选择合适的蛋白酶水解这些多肽链, 把具有生物活性的肽片断释放出来，从而可制备出具有各种各样生理功能的生物活性肽。蛋白质水解产生的活性肽主要是以化学法和酶法水解而来。化学法以酸或碱断开蛋白质肽键, 由于反应环境较极端, 不利于活性的保持。酶法水解蛋白质生产的活性肽安全性高，无副作用，能在温和的条件下进行定位水解分裂产生特定的肽, 且水解过程易于控制，成为当今世界相关领域研究的主要方向。 按功能分类, 生理活性肽包括血管紧缩素转化酶（ACE）抑制肽，抗氧化肽、抗菌肽等，下面重点介绍这些活性肽可能的作用机制。 活性肽构效关系 4 血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性肽的构效关系 1. 氨基酸组成与ACE抑制活性 ACE抑制活性肽的抑制活性与其一级结构和氨基酸组成密切相关。贾俊强等收集270种ACE抑制肽，并分析其氨基酸组成情况，结果表明：与ACE抑制肽N端氨基酸特征相比，其C端氨基酸特征对降血压活性影响更为重要。 ACE抑制肽C端出现酪氨酸（Tyr）、脯氨酸（Pro）、色氨酸（Trp）、苯丙氨酸（Phe）和亮氨酸（Leu）的频率较高，而N端出现精氨酸（Arg）、Tyr、甘氨酸（Gly）、缬氨酸（Val）、丙氨酸（Ala）、异亮氨酸（Ile）和Leu的频率较高； 2. 疏水性和亲水性与ACE抑制活性 多肽的亲水性和疏水性是影响ACE肽活性的重要因素。Kohmura M等认为疏水性氨基酸肽段较亲水性肽段抑制ACE酶活性要强。此外，研究表明多肽N端为疏水氨基酸或为具有侧链的脂肪烃氨基酸时，能够促进肽与ACE结合。对于ACE抑制肽来说，一方面，C端含有的Pro、Phe、Trp、Tyr等疏水性氨基酸残基，利于多肽接近ACE，另一方面，C端含有一些与ACE活性位点亲和力较强的氨基酸，如Arg、Pro等，能够促进多肽与ACE的位点结合，是ACE抑制肽发挥活性的主要因素。 抗氧化多肽的构效关系 自由基是人体代谢的中间产物，正常情况下在体内处于不断产生和不断消除的动态平衡中；过量的自由基使构成细胞组织的各种物质发生氧化伤害，引发人类衰老和许多疾病。抗氧化肽分子量小，易吸收，并能有效地清除体内过剩的活性氧自由基，预防脂质过氧化。 氨基酸组成与抗氧化活性 具有质子供体特性的氨基酸残基是抗氧化肽的必要组成。 如Tyr、Trp通过其供氢能力将氢原子给予自由基后，形成的吲哚自由基和苯氧自由基借助共振而稳定，从而导致自由基链式反应的减慢或终止。有研究报道氨基酸残基的氧化是抗氧化肽能够清除自由基的原因之一，但是游离氨基酸并没有表现出良好的抗氧化活性，因为肽的一级结构是构成其具有抗氧化作用的必要因素。 2.