【生物技术】第五讲植物细胞悬浮培养技术.pptVIP

2.1.2 特点 培养基体积固定 当培养基中的营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长也停止 必须适当搅拌 2.1.3 继代的方法和最佳时期 继代方法：用注射器或移液管吸取一定量的含单细胞和小细胞团的悬浮培养物，并移到含有新鲜培养基的培养瓶里，继续进行培养。 注意：要适当稀释 2.1.4 细胞生长曲线 在整个培养过程中，细胞数目不断发生变化，呈现出明显的由慢到快，再到慢，最后增长停止的细胞周期。 细胞的生长呈S形曲线 由悬浮细胞再生植株的途径 由悬浮细胞直接形成体细胞胚 先将悬浮细胞在半固体培养基上诱导形成愈伤组织，然后再由愈伤组织分化植株 3 细胞悬浮培养的培养基 3.1 悬浮培养对培养基的要求 能用来建立生长快、易散碎的愈伤组织的培养基，一般也适用于建立该物种的悬浮培养。 在活跃生长的悬浮培养物中，无机磷酸盐的消耗很快，不久成为限制因子。 Noguchi等(1977)证明，把烟草悬浮培养物保存在一种含有标准的MS无机盐培养基中，培养开始3d之内无机磷酸盐的浓度就几乎下降为零，即使把培养基中磷酸盐的浓度提高到原来的水平的3倍，5d之内也会被细胞全部用完。 高等植物的悬浮培养，B5和ER培养基。 3.2 条件培养基 把在液体培养基里 培养4～6周的高浓度细胞滤掉，而用他的培养基制成悬滴或薄层来培养单细胞或低密度细胞群体