细胞计数法.docx

2016/4/27微生物學實驗八：微生物計數法原理與目的：測量懸浮液中微生物密度常用的方法有三：(1)直接計數法　在顯微鏡下算出固定體積培養液內的細胞數目，由於細菌細胞太小，容易與溶液中的灰塵混淆，此方法大多用於酵母菌、原生生物與單細胞藻類等較大型的真核微生物；(2)混濁度　利用分光光度計以波長590- 600 nm的可見光測量細菌培養液的混濁度，通常以OD600表示，其數值在0.9以下時與細菌細胞密度呈直線關係，讀取數值超過0.9時則先做10倍稀釋再測量混濁度，獲得的細菌密度乘以10即得到原本的密度；(3)平盤測定法 將細菌培養液作連續10倍稀釋後取一定體積塗在平盤培養基上，培養後計算培養基上的菌落數目以推算出原本的細胞密度。本次實驗學習使用血球計數盤(hemocytometer)進行直接計數，使用可見光分光光度計測定混濁度，及了解標準平盤測定法的原理並學習其操作過程。材料：（每組）培養基：標準平盤計數培養基(standard plate count agar plate) × 5成分：0.5% tryptone, 0.25% yeast extract, 0.5% NaCl, 1.5% agarYPD培養基 × 5成分：1% yeast extract, 2% peptone, 2% dextrose, 1.5% agar菌種：細菌(Deinococcus radioduran