儿童急性白血病免疫分型培训教案.ppt

儿童急性白血病免疫分型 上海市临床检验中心 徐 翀 概述 1．1976年，法、美、英三国（FAB）协作组提出的急性白血病分型标准作为白血病诊断分型的基本方法。 FAB分型法将急性白血病分为： 急性淋巴细胞白血病（ALL）：L1，L2，L3三种亚型 急性非淋巴细胞白血病（ANLL）：M1~M7七种亚型 2．1985年，MIC（Morphology，Immunology，Cytogenetics）研究协作组成立，强调以细胞形态学为主，免疫学和细胞遗传学作补充，相互结合。 3．MICM（Morphology，Immunology，Cytogenetics，Molecular biology）分型 白血病免疫分型的意义 补充形态学检查的不足 淋巴细胞的类型及分化成熟程度 Ly+的AML和M+的ALL 早期未分化或未完成定向分化的细胞 白血病免疫分型的意义 免疫分型与白血病预后的关系 （1）与AML预后相关的抗原 AML高表达CD34的预后差 AML表达淋系相关抗原（CD2，CD7，CD10等）的预后差 AML表达全髓免疫表型的完全缓解率高，达81% （2）与ALL预后有关的抗原 B-ALL表达CD10的，预后最好 B-ALL表达髓系抗原的，预后差 免疫分型 定义：白血病免疫分型是利用单克隆抗体（McAb）检测白血病细胞的细胞膜和细胞浆抗原，分析其表型，以了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。 分型基础：正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现，表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。这些细胞表面和细胞浆内的抗原随着分化成熟过程不断发生改变，称为造血细胞分化抗原。分化抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。 正常血细胞中的抗原表达特点 1. 系列保守性 2. 时序性 3. 抗原表达量的规律性 中性粒细胞的抗原表达 单核细胞的抗原表达 红系细胞的抗原表达 B淋巴细胞的抗原表达 T淋巴细胞的抗原表达 白血病细胞中的抗原表达特点 1. 跨系表达 2. 时相混乱 3. 抗原表达量的改变 1. 急性淋巴细胞白血病 (AL) 2. 急性髓细胞白血病 (AML) 用于急性白血病诊断的抗体组合(St. Jude Children’s Research Hospital, Memphis, Tennessee) 第一轮：初筛白血病细胞的系列来源 用于急性白血病诊断的抗体 B-ALL的分期 T-ALL的分期 AML的亚型特征 CD45在免疫分型中应用的意义 B-ALL示例 T-ALL示例 AML示例 双表型急性白血病记分系统 Catovsky计分表 谢 谢 * * 上 海 市 临 床 检 验 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 上 海 市 临 床 检 验 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory * 上 海 市 临 床 检 验 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory * 上 海 市 临 床 检 验 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 上 海 市 临 床 检 验 中 心 Shanghai Centre for Clinical Laboratory 敏感性 特异性 B-ALL CD19 100% （儿童） 非特异 cCD79a 99% 特异 T-ALL CD7 100% 非特异 cCD3 100% 特异 各系急性白血病诊断中的重要抗原指标 敏感性 特异性 CD13 70% 非特异 CD33 70% 非特异 CD117 70% 特异 MPO 70% 特异 GlyA 特异（红系） CD41 特异（巨核系） B-ALL T-ALL AML CD19 CD7 CD33 cCD79a cCD3 CD13 MPO CD117 B-ALL T-ALL AML CD34 CD34 CD34 TdT TdT CD14 CD22 CD2 CD15 CD10 CD5 CD41 CD20 sCD3 Gly A CD24 CD4 HLA-DR sIgM CD8 CD61 cμ TCRαβ CD64 TCRγδ CD65s CD1a (St. Jude Children’s Research Hospital, Memphis, Tennessee) 第二轮： TdT/CD10/CD34/CD19 TdT-FITC HT6 Supertechs S