菊花的组织培养.pptVIP

1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 四、结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 五、课题延伸 1．一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养 2．实例： 芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 * 细胞分化是否意味着细胞中遗传物质的改变？ 基因的选择性表达 * 专题3:植物的组织培养技术 （一）植物组织培养的基本过程 一、基础知识 1、植物组织培养的原理： 概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成 完整新个体的潜能。 基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有全套遗传物质，都有发育成为完整 个体所必需的全部基因。因为它们都是 由同一个受精卵细胞经有丝分裂和分化而来。 细胞的全能性 有丝分裂 受精卵 细胞分化 在个体发育中，细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程叫做细胞分化。 细胞分化 细胞分化的实质： 基因的选择性表达 1.离体 2.一定的营养物质 3.植物激素：主要是生长素和细胞分裂素 4.适宜的外界环境条件：例如无菌、适宜的温度、PH值、湿度、光照等 细胞全能性大小： 受精卵生殖细胞体细胞 植物细胞动物细胞 分化程度低的细胞分化程度高的细胞 2、植物组织培养的条件： 3、植物组织培养的相关概念： 由高度分化的植物器官、组织或细 胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程. 细胞排列疏松而无规则, 是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞. ②脱分化： ④再分化： ③愈伤组织特点: ①外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段　 （1）不同的植物，培养的难易程度差别很大： ①烟草和胡萝卜的组织培养较为容易； ②枸杞愈伤组织的芽诱导比较难； （2）同一种植物材料的年龄、保存时间的长短 等也会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 （二）影响植物组织培养的因素： 1．植物材料的影响： 2、营养的影响（培养基）---MS培养基 A、大量元素（无机营养）: N、P、K、Ca、Mg、S B、微量元素（无机营养）:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖 D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 Ｎ、Ｐ主要影响蛋白质、核酸的合成； K、 Ca、Mg、S主要影响酶的活性。 蔗糖既是碳源也是维持细胞渗透压的物质； 维生素能促进细胞分裂和诱导器官分化； 甘氨酸是蛋白质的组成成分，也是有机氮源。 讨论：你能说出MS培养基中各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基 的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的 无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗 透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离 体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产 生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养 不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐 混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素 两大类。 常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 3、植物激素的影响 使 用 顺 序 实 验 结 果 使 用 比 例 实 验 结 果 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 ＝ 有利于根的分化，抑制芽的形成 有利于芽的分化，抑制根的形成 促进愈伤组织的形成 激素的使用顺序、使用量及比例影响植物细胞的发育方向： 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 同时使用 细胞既分裂也分化 分化频率提高 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细