李萍《紫外线杀菌试验》.docVIP

紫外线杀菌试验 生物科学121 李一、实验目的 1、了解紫外线的杀菌作用原理。 2、学习紫外线杀菌试验方法。 二、实验原理 1）紫外线杀菌属于射线杀菌的一种 ； 2）杀菌波长240nm-280nm,265nm-266nm范围最强，此范围与DNA吸收光谱一致； 3）其杀菌机制：短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。不同的菌，紫外线的杀菌时间不同 ，杀菌的效果不同。不同的菌，紫外线的杀菌时间不同，对于一般的细菌只要很短的时间，对于有芽孢的菌，它本身抗逆性非常强，因此杀灭的时间会相对更长一些 4)特点：杀菌作用强、穿透能力很弱、适用于空间消毒和表面消毒 三、实验材料和用具 培养24-48h的大肠杆菌 5皿牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 接种环 酒精灯 紫外灯 四、实验步骤 制平板---取无菌平皿5个，将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。 标记---在平板底部标记姓名、日期、班级、实验室号及紫外照射时间(30s,60s,90s,120s,150s）。 接种---用接种环取细菌密集接种于培养基上。 （4）紫外线处理---将紫外灯光开灯预热3min。再将上述平皿置于紫外灯下， 将平板按照时间顺序在紫外灯下方摆成一排，并用平皿盖遮住细菌涂布面的一半。 （5）培养---每隔30s取出一块平皿，放入37℃温箱中孵育18-24h， 注意事项 1.在使用过程中，应保持紫外灯表面的清洁。 2紫外线对皮肤和眼睛有损伤作用，应注意防护。 五、预期结果： 1.盖子盖住的琼脂表面，可见大肠杆菌形成的菌落。 2.直接暴露于紫外线下的琼脂表面无菌生长或只有少量菌生长，且随着照射时间的延长，杀菌效果越好，残余菌越少。 六、实验结果及分析 大肠杆菌 无皿盖 有皿盖 30s 60s 90s 120s 150s 结果分析： 紫外线对微生物有强烈的致死作用，其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。五皿培养皿左半边为无皿盖，右半边为有皿盖，由图可知，从30s-150s，所长菌从多到少，但长得都较多。紫外灯照射时间不同，效果不同，30s下，紫外灯照射对菌生长无明显影响，长的菌都较多。随着时间增加，紫外灯照射对菌生长有了抑制作用，起到的杀菌效果增强。从设置的时间上看，90s后效果开始明显。对比有盖和无盖，当紫外灯照射相同时间，无皿盖的菌长的比有皿盖少。说明有盖能减弱紫外线对菌的杀菌作用，但从150s下的那个皿可以看出，紫外灯对菌杀菌作用即使在有皿盖保护情况下，也会随着时间增加而增强。 总而言之，紫外线杀菌，且随着照射时间的延长，杀菌效果越好，残余菌越少。加皿盖能削弱紫外线对菌的杀菌作用。 不足点： 虽然已经能看出结果，但不明显，接种的菌还不够多，可利用涂布法进行改进。 设置的实验组不够多，应适当增长紫外线照射时间。