华农现代仪器分析复习提纲.docVIP

色谱分析法的工作原理，定性、定量依据。 工作原理：当流动相中样品混合物经过 在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留时间。 通过比较已知物和未知物的保留参数或在固定相上的位置，即可确定未知物是何种物质。 利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中的位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 定量分析 在一定色谱条件下，组分i的质量（mi）与检测器响应讯号（峰面积Ai）成正比。 (1)外标法(标准曲线法)：将欲测组分的纯物质配制成不同浓度的标准溶液进行色谱分析，以峰面积对浓度作图。测得样品的信号后从标准曲线上查出对应浓度。 （2）归一化法 将试样中所有组分的含量之和按100%计算，以它们相应的色谱峰面积或峰高为定量参数，通过下式计算各组分的含量： 气相色谱仪的基本组成部分及各部分的主要部件、特征和功能。 基本组成部分： 载气系统：要求 载气纯净 稳定 进样系统：进样装置和气化室 分离系统：色谱柱 填充色谱柱 毛细管色谱柱 温控系统：气化室 分离室 检测室 检测系统：热导检测器 氢火焰离子化检测器 电子捕获检测器 火焰光度检测器 程序升温用途 池体: 一般用不锈钢制成. 热敏元件：电阻率高、电阻温度系数大、且价廉易加工的钨丝制成。 参考臂：仅允许纯载气通过，通常连接在进样装置之前。 测量臂：需要携带被分离组分的载气流过，则连接在紧靠近分离柱出口处。 工作原理：载气携带试样组分流过测量臂而这时参考臂流过的仍是纯载气，使测量臂的温度改变，引起电阻的变化，测量臂和参考臂的电阻值不等，产生电阻差，R参≠R测 则： R参·R2≠R测·R1 这时电桥失去平衡，a、b两端存在着电位差，有电压信号输出。信号与组分浓度相关。记录仪记录下组分浓度随时间变化的峰状图形。 检测器性能指标。 灵敏度 检测限 无论哪种检测器，检出限都与灵敏度成反比，与噪音成正比。检出限不仅决定于灵敏度，而且受限于噪声，所以它是衡量检测器性能好坏的综合指标。 液相色谱仪的淋洗装置和进样装置 淋洗装置：高压输液泵 梯度洗脱装置：利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 可以根据设定的程序改变溶剂配比，从而改变流动相的极性。 进样装置：流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置 a. 准备状态：样品装入样品环，流动相不进入样品环； b. 进样状态：流动相流进样品环，将样品带入色谱柱。 何为梯度洗脱？什么情况下采用梯度洗脱？ 可以根据设定的程序改变溶剂配比，从而改变流动相的极性。 正相柱、反相柱 亲水性固定相常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正相柱。 若流动相的极性大于固定相的极性，则称为反相液液色谱，非极性柱也称为反相柱。 高效液相色谱的流动相及其选择依据。 按流动相组成分：单组分和多组分； 按极性分：极性、非极性； 按使用方式分：固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂：乙腈、甲醇、水、乙醇、己烷、 乙酸乙酯等。 在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。 液液分配色谱分离原理。 组分在固定相和流动相上的分配 质谱分析的基本原理和仪器组成部分。 基本原理：运动的带电离子在磁场中发生偏转,偏转半径与离子质量有关. 方法是将样品转化为运动的带电气态离子，于磁场中按质荷比(m/z)大小分离并记录的分析方法。 仪器组成部分：真空系统 进样系统 离子源/电离室 质量分离器 离子检测器 记录仪 质谱分析带电离子的形成及种类 电子轰击源：采用高速(高能)电子束冲击 样品，从而产生电子和分子离子M +， M+继续受到电子轰击而引起化学键的 断裂或分子重排,瞬间产生多种离子. 化学电离源：样品分子在承受电子轰击前，被一种反应气(通常是甲烷)稀释，稀释比例约为103:1，因此样品分子与电子的碰撞几率极小，所生成的样品分子离子主要由反应气分子组成。进入电离源的样品分子大部分与CH5+碰撞产生(M+1)+离子；小部分与C2H5+反应，生成(M-1)+离子 质谱图谱。 横坐标是m/e，纵坐标是相对丰度 相对丰度：原始质谱图上最强的离子峰为基峰，定为100%。其它离子峰以此基峰的相对百分值表示。 色谱-质谱联用工作过程，以及各部分所起作用。 核磁共振分析法的基本原理、共振条件。 (1)核磁共振 已知核从低能级自旋态向高能态跃迁时，需要一定