基因工程基因克隆所需的工具酶学习指导书.pptVIP

* 苏州科技学院生物系 叶亚新 一、E.coli DNA聚合酶（DNA pol Ⅰ） 5’--3’外切酶活性 从5‘末端降解dsDNA成为单核甘酸， 5‘ GATAGCCT DNApol 1 5’ TAGCCT 3’ GGCTATCGGA Mg2+ 3’ GGCTATCGGA * 苏州科技学院生物系 叶亚新 E.coli DNA pol Ⅰ在基因工程中的作用 制备高比活的DNA探针（采用缺口平移技术） 用于分子克隆 DNA序列分析 * 苏州科技学院生物系 叶亚新 二、DNA聚合酶Ⅰ大片断（Klenow酶） 5’--3’聚合酶活性 催化单核甘酸结合到DNA模板的3‘－OH末端 5‘CCGOH DNApol 1 5’CCGATAGCCT GGCTATCGGA Mg2+ GGCTATCGGA * 苏州科技学院生物系 叶亚新 二、DNA聚合酶Ⅰ大片断（Klenow酶） 3’--5’外切酶活性 作用底物主要是ssDNA. (其对dsDNA的外切活性由于受到聚合酶作用的阻碍大大降低) * 苏州科技学院生物系 叶亚新 二、DNA聚合酶Ⅰ大片断（Klenow酶） 在基因