第五章细菌的遗传分析教材分析.ppt

第五章  细菌的遗传分析 第一节 细菌的细胞和基因组 第二节 大肠杆菌的突变型及筛选 第三节 大肠杆菌的性别 第四节 中断杂交与重组作图 第五节 F′因子与性导 第六节 转化与转导作图 第一节  细菌的细胞和基因组 第二节 大肠杆菌的突变型及筛选 第三节 大肠杆菌的性别 第四节  中断杂交与重组作图 第五节  F′因子与性导 第六节  转化与转导作图 二、F因子 1.Hayes的实验 ① A菌（链霉素处理）× B菌→原养型菌落 ② A菌 × B菌（链霉素处理）→无菌落 说明： （1）细菌接合中遗传物质的转移是单向的。 （2）菌株A和菌株B虽然来自同一野生型菌株K12，但在杂交中显然起着不同的作用，菌株A相当于雄性，是遗传物质的供体（donor），而菌株B相当于雌性，是遗传物质的受体（receptor）。 大肠杆菌中供体和受体菌株的区别就在于它们是否有一种微小的质粒 —— F因子。 F因子（F factor或 F element）又称性因子（sex factor）或致育因子（fertility factor）。 它是一种封闭的环状 DNA 分子，相对分子质量约为 4.5×106，全长约为9×104 bp，大约为大肠杆菌环状染色体全长的2%，以游离状态存在于细胞质中。 F因子的三种状态：（1）没有F因子，即F－；（2）一个自主状态F因子，即F＋；（3）一个整合到自己染色体内的F因子，即Hfr。 F+×F-杂交 Hfr×F-杂交 三、细菌重组的特点 因此，在细菌的重组中有下列两个特点： （a）只有偶数次交换才能产生平衡的重组子。 （b）不出现相反的重组子，所以在选择培养基上只出现一种重组子。 1954年 Wollman 和 Jacob 大肠杆菌： Hfr：azir tonr lac＋ gal＋ strs F- ：azis tons lac- gal- strr 一、中断杂交实验原理 链霉素敏感 二、中断杂交作图 几个Hfr菌株的基因顺序 gly his gal pur lac pro thr thi 0 AB 312 gal his gly thi thr pro lac pur 0 3 lac pur gal his gly thi thr pro 0 2 pro lac pur gal his gly thi thr 0 1 thi gly his gal pur lac pro thr 0 H Hfr 基 因 转 移 顺 序 菌株 1960，J.Cairns利用电子显微镜观察到大肠杆菌的DNA确实是环状。 大 肠 杆 菌 的 环 状 基 因 图 有四株大肠杆菌分别为1、2、3、4，它们的基因型为a+b，另外四株分别为5、6、7、8，基因型为ab+。将基因型不同的菌株两两混合培养，在基本培养基上测定重组子a+b+出现情况如下表。写出每一个菌株的性别（F+、F-、Hfr）。（表中O代表无重组体，M代表有重组体，L代表有大量重组体） O L L O 4 M O O L 3 O M M O 2 O M M O 1 8 7 6 5 O L L O 4 M O O L 3 O M M O 2 O M M O 1 8 7 6 5 ■细菌的遗传物质的转移是单方向性，即只能从Hfr或F+转向F-。 ■Hfr×F-有大量重组体，F+×F-有少量重组体，其他的接合没有重组体。 1. F+ 2. F+ 3. F- 4. Hfr 5. Hfr 6. F- 7. F- 8. F+ Hfr F＋ 一、F′因子 1959年，Adelberg和Burns发现： 整合到细菌染色体上的F因子，在环出时不够准确，携带出细菌染色体上的一些基因，这种带有染色体基因的附加体称为F′因子（F′factor）F′因子携带染色体的节段大小：从一个标准基因到半个细菌染色体。 二、性导 利用F′因子将供体细胞的基因导入受体细胞的过程称作性导（sex duction）。 F′因子 F+、F-、Hfr、F′之间的关系： F+ F- Hfr F′ 整合 整合 丢失 丢失 获得 脱离 脱离 一、转化 1.转化的发现 肺炎双球菌转化实验 1927 F.Griffith（格里菲思） 肺炎链球菌的转化实验为了证明遗传物质是DNA，但没有进行单因子转化实验。 1944 O.T.Avery 进行单因子转化实验证明DNA是遗传物质。 2.转化的定义 细菌细胞（或其他生物）将周围的供体DNA摄入到体内，并整合到自己染色体组上的过程称为转化（transformation）。 显然，转化就是细菌细胞摄取周围游离的外源DNA片段，通过同源区段的交换而实现基因重组的过