Fish在乳腺癌种的应用课件资料.docVIP

【概念及原理】 ? ?荧光原位杂交技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术，其原理是采用荧光标记的DNA探针，利用探针与被检测样本中DNA碱基对的互补性，在探针与样本的DNA杂交后，通过荧光显微镜检测荧光信号而得出结果，从而检测细胞、组织样本中的染色体或基因异常。 ? 【原理图】 ? 【技术特点】 ?1.操作简单、检测快速、结果易于观察??2.重复性好、空间定位精准 ?3.灵敏度和特异性高 乳腺癌Her-2基因检测相关资料介绍预览 ??????????????? HER-2基因扩增检测试剂盒 1. 乳腺癌的流行病学： 乳癌是女性常见的恶性肿瘤之一，欧美为高发地区，流调学显示欧美的发病率在60～80/10万左右，位列女性恶性肿瘤发生的第一位，且发病率在逐年上升。而乳癌的死亡率大约占女性恶性肿瘤死亡的15％左右，仅次于肺癌（25％）。我国的乳癌发病率在20/10万左右，在女性恶性肿瘤中位列第三位，而且发病率也成逐年上升的趋势。在一些大城市如上海，1999年的调查显示，乳癌的发病率已经达到52.9/10万。因此，乳癌是威胁女性健康的重要恶性疾病 [1~2] 。 2. Her-2与乳腺癌： 在最近的20年中，乳癌的治疗疗效发生了根本性的变化。一些研究显示，尽管乳癌的发生率仍在上升，但在一些地区已经可以观察到乳癌患者的死亡率在逐年下降[3]。这与新的治疗理念如剂量强度和剂量密度以及新的治疗药物如紫杉在临床上的应用是密切相关的。这都使得患者的远期生存较以前得到了明显的改善[4]。不仅如此，随着分子生物学的发展，人们认识到一些信号传导通路在乳癌的发生发展以及对治疗疗效的影响中也起着重要的作用。这其中最主要的就是EGFR家族。EGFR是表达在上皮来源组织细胞表面的一种受体，家族中共有4位成员，分别位Her1、Her2、Her3和Her4，属于酪氨酸激酶受体家族。基础研究显示，这些受体通过同源二聚或异源二聚的方式发生偶联，使受体胞内部分的酪氨酸激酶激活，导致下游的蛋白发生磷酸化，从而发挥调控细胞增殖以及血管生成等作用。而在部分乳癌患者中，上述蛋白表达是明显增加。其结果就使得该信号传导通路被明显激活，从而促进肿瘤的发生发展。 ? 3. 检测HER-2的临床意义： 3.1 HER-2扩增的患者预后更差： Her2基因的过表达除了与肿瘤的发生发展有关外，还是一个重要的临床预后指标[5]。有研究显示，具有Her2基因过表达的患者OS和DFS较短，而且这部分患者就诊时的肿瘤负荷更大，淋巴结转移的几率更高，激素受体阴性的比例更高，组织学分级更差，肿瘤的增殖指数更高，复发风险更高[6]。 3.2正确判断Her-2状态可以辅助临床选择更适合病人的内分泌治疗药物，以及选择疗效最佳的辅助化疗药物，做到合理用药： 研究显示，相对于无Her-2基因扩增的乳癌患者而言，具有Her-2基因扩增的患者应用受他莫昔芬(TAM)治疗后的死亡风险明显增高。提示具有Her-2基因扩增的患者可能不适合应用TAM作为内分泌治疗的选择[10]。 对ER阳性的绝经后患者, HER-2阳性者,来曲唑的疗效明显高于TAM。来曲唑对HER-2阳性患者的疗效优于阴性患者; TAM则相反,对HER-2阴性患者的疗效明显高于阳性患者[10]。 HER-2 /neu扩增的乳腺癌患者对CMF化疗方案的反应性降低； 对HER-2/neu扩增的患者,宜采用高剂量强度的蒽环类药物方案； HER-2阳性的乳腺癌患者对紫杉醇化疗的反应性明显高出HER-2阴性的患者[7]。 3.3? Her-2扩增的患者能明显受益于靶向治疗药物Hercepetin： 2002年美国FDA批准了一种全新的药物Herceptin。到目前为止，已经有多篇关于该药物临床应用的期随机对照研究。结果表明，无论是与常规化疗联合用于乳癌患者的辅助治疗，还是用于辅助治疗后的维持治疗，以及用于晚期乳癌患者的单药或联合治疗，都能肯定的改善Her-2过表达患者的生存，使乳癌患者在上述常规治疗进步的基础上进一步获益[8~9]。在该药物的临床应用过程中，对Her-2基因的检测是至关重要的。因为该药物对那些具有基因扩增的患者具有良好的治疗效果，而对于低度扩增或者是不扩增的患者疗效不理想。 3.4? FISH技术检测Her-2状态结果客观准确，为检测Her-2状态的金标准： 17号染色体非整体性即每个细胞中17号染色体数多于(多体性)或少于(单体性或亚二性)2个，是乳腺癌的遗传学特征之一 。而这种非整体形会造成一部分的病人免疫组化检测（IHC）的假阳性结果，这样的病人在使用Herceptin时效果并不理想。FISH检测技术加入了17号染色体着丝粒探针作为对照探针，因此能明确检测出患者肿瘤细胞的倍体性，避免了Her-2扩增是由于17号染色体非整体性造成的假阳性结果