中药不同配伍干预缺血性心肌重塑实验研究.docVIP

中药不同配伍干预缺血性心肌重塑实验研究 王 阶， 郭丽丽， 郑 军， 潘菊华， 王彦云， 陈 朝， 李多娇 （中国中医科学院广安门医院，北京100053） Effect of Traditional Chinese Medicine compatibility in different states on Ischenmic Left Ventricular Remodeling in rats WANG Ji,GUO Li-li,ZHENG Jun,PAN Ju-hua,WANG Yan-yun,CHEN Zhao,LI Duo-jiao Guang,anmen Hospital China Academy of Chinese Medical Sciences. Beijing 100053,China; [摘要] 目的：比较中药饮片配伍与有效组分配伍抗缺血性心肌重塑的优劣及机制。方法：用结扎大鼠冠脉左前降支的方法制备缺血性心肌重塑动物模型，采用临床有效方剂银丹胶囊的饮片水煎浓缩液及相应药材提取的有效组分配伍作为干预药物，在冠脉结扎72h用超声诊断仪检测心功能，用HE染色观察心脏组织病理改变，用基因芯片分析梗死边缘区与心肌重塑早期密切相关的90个功能基因变化。结果：72h后有效组分配伍组在阻止心室恶性重塑，改善心功能，与模型组比较差异有显著统计学意义（p0.05）；有效组分配伍组作用明显优于饮片配伍组（p0.05）；基因分析表明不同配伍对相关基因的影响不尽相同，基因改变的数目和种类也不是单组分干预的简单加和。结论：有效组分配伍干预缺血性心肌重塑的效果优于饮片配伍。其保护作用与对相关基因的影响相关，但不是单组分作用简单的加和，中药配伍对病变分子干预作用是复杂的。 [关键词] 饮片；有效组分；配伍；缺血性心肌重塑； 配伍用药是中药的主要应用形式，通过配伍提高了疗效、减轻了毒副作用。在中医配伍理论指导下组成的方剂通过“整体综合调节”发挥作用，与西药的单靶点补充、对抗的作用机制不同，在多因素参与的复杂病变如缺血性心肌重塑治疗方面显示出明显优势。 饮片配伍是中药临床应用的传统方式，存在成分不清、机理不明、疗效不稳定等种种不足。为了提高中药方剂的科技含量，有人提出了有效组分配伍的新模式[1]。但有效组分的提取精制是否会引起药效物质丢失？有效组分配伍后针对特定病症的整体药效是否优于饮片层次配伍？每味药单一组分能否代表药物的功效？相互关系如何？ 为了探讨上述问题，我们选择中医优势病种冠心病心肌梗死后心肌重塑为干预对象，临床有效方剂为干预药物，以结扎大鼠冠脉前降支诱发的缺血性心肌重塑为模型，观察饮片层次配伍及其相应提取物有效组分配伍对心肌梗死后早期心肌重塑心功能及心脏组织结构的影响，并对相关基因进行分析，从系统药理学角度探讨上述问题。 材料与方法 1.1 动物 雄性SD大鼠，购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场，SPF级，许可证号SCXK（京）2004-0001，体重220～240 g，本院动物室适应性饲养5d。 1.2 主要药物和试剂 药材丹参购自陕西商洛，三七购自云南文山，银杏叶购自贵州遵义。经本院新药研发中心崔翰明助理研究员鉴定均符合《中国药典》2005年版标准。HPLC测定药材丹参总酚酸含量为4.48％ ；丹参酮含量为0.215％。HPLC测定丹参水溶性提取物中丹酚酸B、丹参酚酸A、原儿茶醛、咖啡酸的含量为72.4%。三七药材含三七总苷4.8%；HPLC测定了三七总皂苷中有效成分人参皂苷Rb1、Rg1、 Re和三七皂苷R1含量为52.18％。银杏提取物由宁波市中药厂生产，总黄酮含量24.31%；银杏内酯6.8%,银杏酸含量小于10-6。戊巴比妥钠，北京化学试剂公司产品，批号020919。功能基因检测试剂盒，美国SuperArray 公司产品。 1.3 主要仪器设备 HX-300动物呼吸机，成都泰盟科技有限公司产品。IX-70 Image-pro plus4.5图像分析系统，OLYMPUS产品。HP-5500彩色多普勒超声诊断仪，惠普公司产品。ABI Prism 7700 (Applied Biosystems)PCR 分析仪。 1.3 缺血性心肌重塑模型制备[2] 参照文献方法进行。假手术组只开胸，穿线，但不结扎。 1.4 受试药物制备 有效组分配伍组取丹参、三七、银杏叶提取物按2：1：1比例配伍，制成24 mg·ml -1混悬液备用。饮片配伍组根据药材中相应组分含量进行折算为相应饮片重量，水煎浓缩成生药含量为0.5 g·ml -1药液备用。阳性对照药卡托普利配成1 mg·ml -1混悬液备用。 1.5 分组与给药 大鼠随机分为假手术组，模型组，阳性对照药卡托普利组，饮片配伍组和丹参总酚酸+三七总苷+银杏提取物（Sal