中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤.docVIP

中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤 杨永生 2009级研究生 学号：2009110100 摘要 目的：介绍中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤，为祖国传统医药走向世界提供手段方法。方法：归纳国内近年关于指纹图谱的大量文献，分析其研究的方法，在中蒙药制剂质量控制中起到了重要作用。结果：中蒙药制剂指纹图谱技术进展很快 完全可以利用其作为中蒙药质量控制的手段。结论：中蒙药制剂指纹图谱的研究进展很快其科学的方法和步骤可以更好的提升中蒙药质量，中蒙药制剂指纹图谱技术一定可以加速祖国传统医药走向世界。 关键词 中蒙药制剂指纹图谱；方法和步骤 中蒙药是我国人民在数千年治疗疾病过程中积累起来的宝贵财富，中蒙药生产和质量的规范化和现代化是祖国传统医药走向世界的重要前提，目前中蒙药正处于迈向现代化的瓶颈阶段，中蒙药制剂指纹图谱的出现为解决这个问题提供了现代技术手段、中蒙药制剂指纹图谱近年来进展很快，本文综合了国内近年的有关文献对中蒙药制剂指纹图谱的建立和辨认的方法和步骤作一论述。 1、中蒙药指纹图谱的定义、特点、分类 1.1 定义：中蒙药指纹图谱是指某种（或某产地）中蒙药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段,得到的能够标志该中蒙药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱。利用色谱技术进行指纹图谱分析的中蒙药材因生长年限，生长环境的变化而可能产生个体间较为明显的差异，但个体间必然有群体共有的相似性[1]。 1.2 特点：①通过指纹图谱的特异性，能有效鉴别样品的真伪或产地；②通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保质量的相对稳定。中蒙药指纹图谱有两个基本属性[2]：整体性和模糊性。 1.3 分类：按应用对象来分类，可分为中蒙药材(原料药材)指纹图谱、中蒙药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指纹图谱、中蒙药中间体（工艺生产过程中间产物）指纹图谱和中蒙药制剂指纹图谱。按测定手段可分为：中蒙药化学指纹图谱和中蒙药生物指纹图谱。中蒙药化学指纹图谱系指采用色谱、光谱和其他分析方法建立的用以表征中蒙药化学成分的特征的指纹图谱；中蒙药生物指纹图谱包括中蒙药材DNA指纹图谱、中蒙药基因组学指纹图谱及中蒙药蛋白组学指纹图谱。中蒙药基因组学图谱和中蒙药蛋白组学指纹图谱系指用中蒙药制剂作用于某特定细胞或动物后，引起的基因和蛋白的复杂的变化情况，这两种指纹图谱似可称为生物活性指纹图谱。此外还有扫描电镜（SEM）指纹图谱、计算机图象（CIA）指纹图谱等。 2、 建立指纹图谱的方法[3] 见图1。 中蒙药样品 预处理(提取分离) 测试样 色谱分析(TLC、HPLC、 GC、GC—MS、LC一MS 等) 色谱图 （计算机图谱解析与处理) 药效 对应关系 指纹特征 指纹图谱 质量稳定性评价 质量稳定性评价结果 方法学考察：重现性、稳定性、精密度。 图1 指纹图谱建立方法示意图 3、指纹图谱的分类[4] 3.1 薄层色谱法（TLC）： 是指将中蒙药材或中蒙药制剂的样品溶液点于特制的薄层板上，以适当的展开剂展开，取出晾干后，采取适当的显色后，建立的指纹图谱，然后比较图谱的相似性及差异；TLC最早应用于指纹图谱研究，具有快速、经济、可靠、操作简单、适用范围广、重现性好等优点，为国内外学者最快接受和广为使用。林明美[5]等对柴胡10个品种近40个样品进行了薄层指纹分析。将柴胡根中的挥发油、乙烷提取物及甲醇提取物，分别进行薄层层析及薄层扫描。结果发现，皂苷d、a、c为柴胡属植物的特征性成分。不同品种的柴胡，来源区别显著者，其指纹图谱差异也显著，因此可根据图谱去推断药材的品种。颜玉贞[6]等用经过优化的系统在双槽展开箱中用硅胶薄层板作两次展开，对黄连所含原小檗碱型生物碱进行薄层色谱分离，其荧光及紫外扫描图可作为黄连药材的指纹图谱，以此确定不同黄连样品中主要生物碱的分布。3.2?气相色谱法（GC）：系指利用气相色谱仪分离、测定中蒙药材及其制剂的样品溶液而得到的图谱。主要用于含挥发性成分的中蒙药材及其制剂的分析，该法具有高效、高灵敏度、样品用量少和分析速度快等优点。谢培山[7]等建立了高良姜挥发油成分指纹图谱的研究方法，以鉴别高良姜的质量优劣。在中蒙药指纹图谱的研究中，更多地采用气相色谱一质谱(GC—MS)联用的技术。李晓宁等利用色质联用仪产生的双线性数据，藉化学计量学发展的二维色谱质谱数据解析方法，对辽五味子果实挥发油、熟地黄石油醚酸性提取物等进行了解析与鉴定。3.3 高效液相色谱法（HPLC）：是利用高效液相色谱仪分离、测定中蒙药材及其制剂的样品溶液而建立的指纹图谱以及一些鉴别参数。可根据被测样品中所含化学