1.1 DNA重组技术的基本工具.ppt

* * 1.1 DNA重组技术的基本工具 问题引领 1、基因工程的定义 2、基因工程的三种工具名称 3、限制酶的来源、种类、作用、结果 4、DNA连接酶的种类、作用 5、质粒的特点、标记基因的作用 6、载体必备的5个条件、种类 基因工程的概念 原理 目的 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的生物类型和生物产品 基因重组 基因工程概念的分析 DNA重组技术的基本工具 “分子手术刀”-- “分子缝合针”-- “分子运输车”-- 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 载体 1、EcoRI只能识别GAATTC的核苷酸序列且 只能从G和A之间切开，画出切割结果： 2、SmaI只能识别CCCGGG的核苷酸序列且只 能从C和G之间切开,画出切割后的结果： GAATTC CTTAAG EcoRI CCCGGG GGGCCC SmaI 练习： 3、课本P6的“模拟制作” 4、P7“思考与探究”第1题 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1、来源： 主要是原核生物（约300种） 2、种类： 3、作用： 4、结果： 约4000种 识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成两种末端 黏性末端 平末端 1、种类： 2、作用部位： E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 二、 DNA连接酶——“分子缝合针” （黏性末端） （黏性末端和平末端） GAATTC CTTAAG EcoRI 练习： GAATTC CTTAAG EcoRI ( ) 三、载体——“分子运输车” 1、载体的作用 将 转移到受体细胞中去。 目的基因 2、常用的载体 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 3、作为载体必须具备的5个条件 练习：1、画出一个载体模式图 2、P7“思考与探究”的第2-4题 1、关于限制酶的说法中，正确的是 A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱 基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分 子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中 课堂巩固 C *