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发酵工程综合实验报告实验题目 蛋白酶的发酵工艺研究 院系名称 生物与食品工程学院 学院：生物与食品工程学院2015年 7月 31日 目录标题1摘要1关键词21.引言22.材料与方法32.1材料32.1.1菌种32.1.2试剂32.1.3培养基42.1.4实验仪器42.2方法42.2.1蛋白酶酶活测定42.2.2总可溶性糖测定52.2.3枯草芽孢杆菌发酵实验62.2.4发酵罐实验62.2.5蛋白酶性质实验73.结果与分析73.1透明圈观察73.2标准曲线83.2.1酪氨酸标准曲线83.2.2葡萄糖标准曲线93.3不同装液量摇瓶发酵实验93.4小型发酵罐发酵实验113.5蛋白酶性质研究123.5.1最适pH测定及pH影响酶稳定性的研究123.5.2最适温度测定及p温度影响酶稳定性的研究133.6小结154.致谢165.参考文献17 蛋白酶的发酵工艺研究Study on Protease Fermentation Conditions摘要：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)能够产生大量的蛋白酶，是进行蛋白酶研究的良好材料。本次实验目的在于学习蛋白酶的定性定量测定方法，考察营养及环境对酶生产的影响，以及熟悉小型发酵罐的使用。我们控制装液量为唯一变量，测定酶活及总糖变化，最终确定最佳装液量条件为60ml。在此基础上，我们进一步确定了最适温度为40℃，最适pH为5。我们挑选透明圈较大的菌落在小型发酵罐进行发酵，定时取样测定酶活与总糖，绘制发酵曲线，从而了解菌体生长情况。Abstract: Bacillus subtilis can produce much protease and can be a good meterial for research about protease.The purposes of this experiment are learning how to measure protease qualitatively and quantificationly,investigating how the nutrition and environment influence the output of protease,and trying to be familiar with small-sized fermentation cylinder.We controlled fluid volume as the only variable quantity,measured enzyme activity and total sugar quantity,finally confirmed that the best fluid colume condition is 60ml.On this basis,we moved forward a single step to conclude that the best temperature is 40℃ and the best pH is 5.We chose the bacterial colony with bigger transparent circle to ferment in the small-sized fermentation cylinder,measured enzyme actity and total sugar quantity at regular time,then drew the fermentation curve,consequently we could know how was the situation of the growing bacterium.关键词：枯草芽孢杆菌,蛋白酶,酶活,总糖,装液量Keywords:Bacillus subtilis,protease,enzyme actiivity,total sugar quantity,fluid volume1.引言 蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。按其降解多肽的方式分成内肽酶和端肽酶两类。前者可把大分子量的多肽链从中间切断，形成分子量较小的朊和胨；后者又可分为羧肽酶和氨肽酶，它们分别从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐一将肽链水解生成氨基酸。 皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶，既节省时间，又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用，如用胃蛋白酶治疗消化不良，用酸性蛋白酶治疗支气管炎，用惮性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的治疗。加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品，含碱性蛋白酶，能去除衣物上的血渍和蛋白污物，但使用时注意不要接触皮肤，以