中药化学第五章-2课件.pptVIP

（二）、吸附柱色谱操作技术 吸附柱色谱的制备 上样 洗脱 1、吸附柱色谱的制备 　 （1）层析柱的选择 层析柱一般使用下端带有活塞的玻璃管，柱 的直径与高度比为1:10～40，柱的大小一般以能 装样品的30～50倍量的吸附剂（通常为100目左 右）为好。 　　　 　　　 （2）装柱 先将空色谱柱清洗干净，干燥后在色谱柱 管底部铺一层脱脂棉，再加一层厚约0.5cm的石 英砂，然后选择具体的方法。 1）干法装柱：直接用小漏斗将吸附剂均匀 装入柱内的方法； 2）湿法装柱：将吸附剂装入盛有洗脱液的 柱内，或将吸附剂与适量的洗脱剂混合成混悬液 均匀装入柱内的方法。 （3）装柱要点 干法装柱时要用橡皮槌轻轻敲打色谱柱，使吸附 剂装填连续、紧密； 湿法装柱要连续缓慢地倒入色谱柱内，打开色谱 柱下端活塞，低速放出洗脱剂，使吸附剂慢慢沉 降注意继续补充洗脱液，保持流速，确保液面高 于吸附剂的表面同时轻轻敲打柱壁，至吸附剂沉 降完全。 要求柱中吸附剂充填均匀，柱体内不能出现 空气泡、疏密不均或裂缝。为增强分离效果提高 分离速度可在柱面覆盖一层干净、均匀的细沙 。 　　　 2、? 加样:又称上样或样品上柱。 　　　多将样品溶于少量洗脱剂中，小心的加入层析柱顶端的平面内；也可将样品与易挥发溶剂混合后，再与吸附剂吸收、挥干挥发性溶剂后，