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从酶的专一性看植酸酶与酸性磷酸酶的关系 摘 要:迄今为止的资料表明,大多数植酸酶与酸性磷酸酶的关系密切。通过测定Km,即可判断只有以植酸(盐)为最适底物的酶(包括酸性磷酸酶)才是严格意义上的植酸酶。 关键词:酶的专一性;植酸酶;酸性磷酸酶 Discussion on relationship between phytase and acid phosphatase by specificity of enzyme Abstracts:It is proved that the close relationship between phytase and acid phosphatase. By detection ofKm of the enzymes, the phytase can be distinguished strictly from the enzymes ( including acid phosphatase) using phytic acid or salts ofphytic acid as the op- timum substrate only. Keywords:specificity of enzyme; phytase; acid phosphatase 迄今为止,除了从极个别生物中发现了中性植酸 酶[1-2]和碱性植酸酶[3]外,因生产需要而发现的其余 的植酸酶均为在酸性条件下起作用的植酸酶,而且主 要是微生物来源的植酸酶[3-4]。 目前,世界公认的植酸酶主要是3-植酸酶(EC. 3111318)和6-植酸酶(EC.。真菌和大多数 细菌的植酸酶属于3-植酸酶,而大肠杆菌的属于6-植 酸酶。这两种植酸酶降解六磷酸肌醇的方式不同[5]。 从目前的情况看,微生物来源的植酸酶的最适pH值 范围较宽,一般在pH值215~610之间[3]。随着研究 的深入,不同的学者发现,有的植酸酶具有酸性磷酸酶 活性,有的酸性磷酸酶具有植酸酶活性,有的则说植酸 酶是一类特殊的酸性磷酸酶[6]。但是前人已经较广泛 地研究了酸性磷酸酶,它在酶表中的位置编号是 EC3111312[7],我们可以看出它显然与植酸酶是有所不 同的!那么,在这些意见中哪个更加妥当?在这里如 何准确判断一种酶是叫植酸酶还是酸性磷酸酶为宜 呢? 1测定Km可以帮助判断一个酶是植酸酶还是酸性 磷酸酶 生化基础理论告诉我们[8],酶的催化作用显出高 度专一性。当酶只能催化一种底物发生一定的反应 时,显出绝对专一性,而当酶催化某一类物质发生一定 的反应时,则显出相对专一性。在这里酶对其底物及 所催化的反应性质或类型都是有所要求的。当酶有若 干种物质可作为其底物时,酶对它们的亲和力一般是 有所不同的。这时可在一定反应条件下测定酶在分别 催化这些底物反应时的Km,确定Km最小的物质为其 天然底物或最适底物。一般讲,酶的命名以其最适底 物来命名是最为妥当的。 我们来分析一下植酸酶的研究过程中的几个例 子。 69 第27卷第3期 2010年6月 生物学杂志 JOURNALOF BIOLOGY Vol127 No13 Jun, 2010日本的Nagai和Funahash[9]于1962年报道在麦麸 中发现纯化了的植酸酶。在其文章所列数据中,以肌 醇六磷酸(即植酸)为基准,测得该植酸酶对不同底物 的相对活性的大小顺序为焦磷酸(460%,注,指相对活 性,下同)ATP(350% )酚基磷酸(250% )ADP (220% )果糖二磷酸(130% )肌醇六磷酸(100% ) NADP+(90% )=A-磷酸甘油(90% )B-磷酸甘油 (65% )6-磷酸葡萄糖(50% )AMP(40% ),至于以 二酚基磷酸、NAD+、酵母RNA、1-磷酸葡萄糖为底物 时,则根本未测出活性。在文中该酶以焦磷酸、B-磷酸 甘油、酚基磷酸及植酸为底物所测Km中,植酸的的确 最小,但作者并未报道酶对以上其它底物的Km,因而 该酶难以称得上是真正意义上的植酸酶。可能因为这 个原因,Nagai和Funahash本人也于文中承认该酶不 是一个对植酸特异性的植酸酶。 而李明刚等[10]在研究所纯化的番茄植酸酶时,比 较了该酶分别作用于植酸钠、P1-对硝基苯酚磷酸、果 糖-6-磷酸、ATP、焦磷酸、2-甘油磷酸时的Km,表明该 酶作用于植酸钠时的Km最小。因而称该酶为植酸酶 就要严谨一些,尽管它对上述其它物质也同样存在一 定的催化作用。 可见,通过Km的测定,可以弄清楚一个酶是一个 以植酸(盐)作为最适底物的植酸酶,还是一个只对植 酸(盐)有一定作用的广谱的酸性磷酸酶。 2除极少数情况外,植酸酶往往与酸性磷酸酶关系 密切 研究表明,许多植酸酶属于组氨酸酸