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- 2017-04-09 发布于上海
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1.2 基因工程的基本操作程序
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1.掌握目的基因获取的常见方法。 [难点]
2.学会基因表达载体构建的方法和要求。 [重点]
3.理解目的基因导入受体细胞的具体过程。
4.掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。 [要点]
一、目的基因的获取
1..从基因文库中获取目的基因
将含有某种生物的不同______的DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。
基因
基因文库包括两种:________文库,即包含一种生物所有基因的文库;__________文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库,如cDNA文库。
2.利用PCR技术扩增目的基因
(1)PCR的含义:是一项在生物______复制特定DNA片段的核酸合成技术。
(2)目的:短时间内大量扩增目的基因。
(3)原理:________________。
基因组
部分基因
体外
DNA双链复制
(4)过程:
第一步:加热至90~95℃,_______________ ;
第二步:冷却至_________℃,引物与两条单链DNA相应互补序列结合;
第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。
如此重复循环多次。
(5)特点:指数形式扩增。
DNA解链为单链
55~60
想一想
1.PCR过程中,需要解旋酶吗?所需要的DNA聚合酶应具有什么特点?
【提
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