透射电镜培训笔记.docVIP

电镜培训笔记 （2009.7.3） 一 样品的安装和取出 单倾台的使用方法 将单倾样品杆放入玻璃管holder中; 将针尖状Tool插入Spring Clamp尾部小孔中,并轻轻抬起, 露出Specimen carrier; 将样品放入样品杆中心圆孔台中,若位置有偏差,可轻敲样品杆,使样品落入正确位置, 然后轻轻放下Spring Clamp; 样品安装完成后需要轻敲样品杆尾端数次,确认样品位置无变化且无掉落的危险; 取出样品时可将镊子尖端插入tweezer notch, 将样品取出. ?插入样品杆? 将样品杆上的pin对准compustage 前面板上的closed线对齐,然后将其插入airlock 孔中. 此时, 面板上的红灯亮, airlock开始预抽气; 在TUI软件中选择正确的样品杆类型,并点击Enter键; 等待一段时间(120s), 直到面板上的红灯熄灭, 逆时针旋转样品杆大约120度（至open位置附近）, 并轻轻将样品杆送入镜筒; 样品杆完全进入镜筒后,轻敲其尾部数下,使其状态稳定. 关闭分子泵。 3 移出样品杆 1) 关闭column valves； 2） Search --- stage---- control---reset the holder；复位样品杆，此时其X, Y, Z, A, B 值应在零附近； 3）将左手压住compustage样品杆周围部位并轻轻用力，右手将样品杆拉出至不能拉出为止（不要用力过大），然后顺时针旋转120度，最后将样品杆取出。 二 电镜观察 1. 准备工作 1） 将液氮放入冷井液氮容器中； 2） 检查真空状态，要求IGP1 30 （log单位，以下同）: 3） 如需要，将样品杆放入镜筒中； 4) 如需要，点击FEG Control面板中的Operate钮，启动灯丝（注：每天工作结束时不需要停止FEG灯丝） 5）点击Vacuum面板上的Col. Valves Closed按钮，使其变灰，打开镜筒真空阀门，此时V7、V4阀门打开。（注：此项操作目的是使电子束能够通过镜筒，进行各项电镜操作前均应进行此操作。但须注意，电镜停止工作或取、放样品时均应关闭镜筒真空阀门，以保护电子枪室的真空）。 2 电子束的调整（不必每次都做） 将样品架移出一段距离（约15mm），并用笔等物品固定住样品架位置，使电子束可以不受阻挡的照射到荧光屏上； 利用轨迹球（beam shift）使电子束位于荧光屏中心位置，同时利用Intesity 旋钮调整电子束的照射面积和亮度； 如果发现电子束呈椭圆形，则需要调整聚光镜像散： A 调出Stigmator面板；选中Condenser选项； B 调整MFx和MFy，使电子束光斑变圆。调整时可利用Intensity旋钮使电子束光斑变小，此时MFx和MFy中有一个旋钮起主要作用，调整该旋钮使光斑变圆，反复操作，直至电子束变圆。 在高放大倍数下，如果发现下电子束中心小亮斑偏离光束的中心位置，需要进行gun alignment： A 在Alignment 面板上选择gun选项，并按照提示进行； B 进行gun Alignment的同时可以调整聚光镜像散，但stignmator面板不能同时从workset中调出（会终止当前gun alignment工作），可从TUI右下方的 面板选择工具框中调出stignmator工具面板。 3 电镜样品eucentric height的调整 1）按前述要求做好拍摄前准备工作； 2）打开镜筒真空阀门，选择适当的放大倍数（数万倍较好）和光束强度，并选择适当的观察区域（通常将较明显的特征点放至在荧光屏中心）； 3）调整样品中心至eucentic height，方法有多种： 方法一： the α ?wobbler 使用 search—stage panel 上的a wobbler 功能（通常将最大alpha 倾转角设为15度）； 若样品不处在eucentic height，图像会摆动，此时调整Z轴使图像中心摆动最小或几乎不动。 关闭wobbler 功能。 /*注：此方法最为准确可靠，通常用来检查其他调整方法的准确性，平时应避免频繁使用此方法，以免造成样品台的损坏*/  方法二: the focus wobbler 按下右面板上的 Eucentric focus 键, 将物镜电流调整到标准