动物实验操作技术.docVIP

　动物实验基本操作技术 动物实验是医学研究的基本手段，是药物安全性评价的必经途径。娴熟的动物实验操作技术和技巧，是顺利完成动物实验并取得准确、可靠的结果和好的反应重复性的保证。对实验动物饲养管理人员和兽医技术人员来说，动物不会讲话，不领人情，具有自卫本能，随时准备攻击兽医及其他工作人员，更不会自动地服药和接受必要的检查和治疗，这无疑给平时的饲养管理和兽医治疗工作增添不少麻烦。所以无论是饲养人员还是动物实验人员都必须熟练掌握常规的和一些特殊的实验动物学技术，才能科学合理地养好实验动物，规范熟练地开展动物实验，有效地对患病动物进行检查、诊断和治疗。同时也不会造成动物的应激反应或伤害，也不致给饲养管理和动物实验技术人员自身造成意外的伤害。 实验动物的抓取与固定 一、大、小鼠的抓取固定法 1．小鼠的抓取固定方法 先用右手抓取鼠尾并提起，置于鼠盒的笼盖或实验台上向后拉，在其向前爬时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿。也可用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指、食指和中指按住其耳后颈背部皮肤亦可，适宜作灌胃，皮下、肌肉、腹腔注射等实验操作。 2．大鼠的抓取固定方法 基本上与抓取小鼠相同，轻轻抓住鼠尾根部，将大鼠提起置于鼠盒笼盖上，迅速用左手拇指和食指捏住鼠耳后下方，固定其头部，不得让其转动，余下二指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心，右手即可进行腹腔、肌肉、皮下注射与灌胃或各种实验操作。注意不用袭击方法抓取大鼠，否则易被咬伤。解剖手术和心脏采血，可先麻醉动物，取背卧位，再用细绳活结或大头针将鼠前后肢分别固定在板上。尾静脉注射或采血时，可用鼠静脉注射架固定，先选择合适固定架，打开鼠筒盖，将鼠尾提起，鼠身放入固定架，露出尾巴，盖好筒盖，即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。 二、豚鼠的抓取固定法 基本上与大鼠相同，只是由于豚鼠较胆小，易受惊，所以抓取时必须稳、准和迅速。可先用一手迅速抓住鼠背肩胛上方，用力下压固定后，以拇指和食指环握颈部，用另一只手托住臀部即可。 三、家兔的抓取固定法 抓取家兔一般用右手抓住兔颈部的毛皮，并提起，用左手托其臀部或腹部，让其身体重量的大部分集中在左手上。注意不能用手抓双耳或腹部，以免损伤动物。 家兔的固定分为盒式、台式两种。如作兔耳血管注射和兔耳采血时，可用盒式固定；如作呼吸、血压测定实验和手术时，则可用台式固定。其方法是将家兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定栓上，头用固定夹固定，或用一根粗棉绳兜住兔的切齿绑在兔保定台铁柱上。 四、狗的抓取固定法 毕格狗能主动配合实验人员，抓取时动作要温柔，一般不会攻击人。抓取杂种狗时，为了防止其咬人，最好首先让饲养员帮助绑住狗嘴。或先轻轻抚摸其颈背部皮毛，然后用布带迅速兜住狗的下颌，绕到上颌打一个结，再绕回下颌打第二个结，然后将布带引至头后，颈项部再打两个结，这样就将狗嘴捆绑住了，注意松紧要适宜。如狗过于凶猛，则可先用狗头钳夹住其颈部，将狗按倒在地，再扎其嘴。 狗的固定也可先将狗麻醉后，采用头部固定和四肢固定法，头部固定可用一圆铁圈的狗头固定器，圈中央有一弓形铁，与棒螺丝相连，下面有一根平直铁闩，操作时，先将狗舌拉出，把狗嘴插入固定的铁圈内，再用平直铁闩横贯于尖牙后部的上下颌之间，然后向下旋转棒螺丝，使弓形铁逐渐下压在狗的下颌骨上，把铁柄固定在实验台的铁柱上即可。四肢固定法与家兔相同。 性别鉴定 动物实验中，经常要涉及雌雄动物的鉴别。性成熟后的哺乳类动物性别一般易于区分，因为雄性个体睾丸已从腹腔下降至阴囊内，雌性动物的阴道也已开口。除了生殖器官本身外，在某些动物中还可以根据第二性征来判断。但是，对于新生动物来说，性别鉴定就较为困难。下面介绍一些常用区分方法。 一、哺乳类 一般情况下，哺乳类动物性别依据动物的肛门与外生殖器(阴茎或阴道)之间的距离加以区分。雄性要比雌性的距离更长。 1．啮齿目 大鼠、小鼠、沙鼠可用肛门生殖器间距离加以区分。成年大、小鼠性别极易区别。雌性生殖器与肛门之间有一无毛小沟，距离较近。雄性可见明显的阴囊，生殖器突起较雌鼠大，肛门和生殖器之间长毛。幼年鼠则主要靠肛门与生殖器的距离远近来判别，近的为雌性，远的为雄性。但这种方法对豚鼠和地鼠则用处不大。豚鼠和地鼠用手压迫会阴部，雄鼠有阴茎突起，雌鼠则无，但可见阴道口呈“V” 形。另一种方法可以通过乳头的出现来区分大、小鼠。雌性小鼠2-13日龄可见乳头的出现。雌性大鼠3日龄就可见乳头，12到15日龄更明显，此后两种鼠的乳头就被被毛遮掩。对于成年豚鼠在其肛门-生殖器部位之前施加轻微压力便可使阴茎伸出。雌性豚鼠有阴道关闭膜(一种除了发情和分娩时外，关闭阴道口的细胞结构