2-光学分析法与元素分析法幻灯片.pptVIP

第三章 光学分析法 光分析方法的分类 UV-Vis方法是分子光谱方法，它利用分子对外来辐射的选择性吸收特性。 UV-Vis涉及分子外层电子的能级跃迁；光谱区在160~780nm. UV-Vis主要用于分子的定量分析，但紫外光谱(UV)为四大波谱之一，是鉴定许多化合物，尤其是有机化合物的重要定性工具之一。 2. 能级组成：除了电子能级外，分子吸收能量将伴随着分子的振动和转动，即同时将发生振动能级和转动能级的跃迁！据量子力学理论，分子的振-转跃迁也是量子化的或者说将产生非连续谱。因此，分子的能量变化?E为各种形式能量变化的总和： 其中?Ee最大：1-20 eV; ?Ev次之：0.05-1 eV; ?Er最小：?0.05 eV 可见，电子能级间隔比振动能级和转动能级间隔大1~2个数量级，在发生电子能级跃迁时，伴有振-转能级的跃迁，形成所谓的带状光谱。 紫外-可见光度计仪器组成 一、基本组成 general process 二、分光光度计的类型 types of spectrometer 一、基本组成 general process 2.单色器 3.样品室 二、分光光度计的类型 types of spectrometer 光路图 分析条件选择 一、仪器测量条件 由于光源不稳定性、读数不准等带来的误差。当分析高浓度的样品时，误差更大。 当A=0.434 时，吸光度读数误差最小！ 通常可通过调节溶液浓度或改变光程b来控制A的读数在0.15~1.00范围内。 三、参比液选择 当强度为I0的入射光束(Incident beam) 通过装有均匀待测物的介质时，该光束将被部分吸收，未被吸收的光将透过(Emergent)待测物溶液以及通过散射(Scattering)、反射(Reflection),包括在液面和容器表面的反射)而损失，这种损失有时可达10%，那么， I0=Ie + Is +I r 因此，在样品测量时必须同时采用参比池和参比溶液扣除这些影响！ 参比液种类 1.溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比； 2. 试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，采用试剂作参比（不加待测物）； 3. 试样参比：如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显色剂反应时，可以试样 作参比（不能加显色剂）。 具体应用 一、定性分析 二、纯度检查 三、定量分析 四、固体样品的分析 一、定性分析 1、利用标准物质定性 在相同条件下，用光谱扫描法测定未知物的吸收光谱，与所推断化合物的标准物的吸收光谱进行比较，如果两吸收光谱的形状和吸收峰的数目、位置、拐点等完全一致，就可初步判定未知物与标准物是同一种物质。但要注意，物质不同但光谱相似的特殊情况。2、用波长位置判断有机化合物的生色基团 例如，若发现在210-250nm有强吸收峰，则可能有双键并处在共扼状态。在260nm、300nm、330nm有高强度的吸收带，表示有3-5个共扼单位，如在270-300nm之间有弱吸收(e=10-100)，表示有羟基的存在；在250-300nm之间有中强度吸收(e=1000 -10000)，表示有苯环存在等。 二、纯度检查 主要用于检查对光没有特征吸收的化合物中的具有特征吸收的杂质。  如检查乙醇中醛的量，可用蒸馏水作参比，在270 -290 nm处测量吸光度，如在280nm处有吸收，表示有醛。 双波长或三波长核酸（DNA、RNA）的测定时，根据A260 / A280的比值可确定DNA或RNA的纯度。对于DNA，比值为1.6-1.8之间,RNA比值为1.8-2.0之间,认为纯度较高。 又如四氯化碳中，最主要的杂质是二硫化碳（CS2）。二硫化碳杂质的多少，衡量产品质量的好坏。二硫化碳在紫外区的318nm处有一个很强的吸收峰。因此，只要检查318nm处二硫化碳吸收峰的大小，就可知道四氯化碳产品是否合格。 三. 定量分析 定量分析方法 1、绝对法 基于朗伯-比尔定律A =ebC ，当某一物质在一定波长下e为一常数，比色皿的光程也是已知，也是一个常数，只要在吸收系数指定的波长处测定样品溶液的吸光度值(A值)，然后由下式求得该样品溶液的浓度或含量： C = A / e b 2、标准对照法  在同样条件下，在选定的波长处，分别测定已知浓度标准溶液的吸光度值A标和样品溶液的吸光度值A样，然后由下式求得样品溶液的浓度或含量： C样 = A样 ? A标