生化实验1分解.doc

生物化学实验报告 姓 名： 张雪 学 号： 1120011012 专业年级： 2012级临床医学八年制 组 别： 第二实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称 (Title of Experimetn) 氨基酸的薄层分析 实验日期 (Date of Experiment) 2014-04-17 实验地点(Lab No.) 第二实验室 合作者(Partner) 胡云腾 指导老师(Instructor) 王妮莎 总分 (Total Score) XX 教师签名(Signature) 李某某 批改日期 (Date) 2013-06-03 【实验报告第一部分（预习报告内容）：①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材）、③实验步骤（包括实验流程、操作步骤和注意事项）；评分（满分30分）：XX】 ①实验原理 层析中，物质沿溶剂运动方向迁移的距离与溶液前沿的距离之比为Rf值。 由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率（Rf值）也是恒定的，因此可以根据Rf值来鉴定被分离的物质。Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。 ②实验材料 粘合剂： 0.5%的羧甲基纤维素钠 氨基酸的异丙醇溶液: 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸 -显色剂（正丁醇、乙酸、茚三酮溶液） 分析样品：氨基酸混合液 层析板、尺子、铅笔、烧杯、量筒、喷雾器、吹风机、毛细管、层析缸、药匙、烘烤箱 ③实验步骤①主要实验条件（如材料的来源、质量；试剂的规格、用量、浓度；实验时间、操作要点中的技巧、失误等，以便总结实验时进行核对和作为查找成败原因的参考依据）；②实验中观察到的现象（如加入试剂后溶液颜色的变化）；③原始实验数据。评分（满分20分）：XX】 实验条件：用10ml量筒量取8ml0.5%的羧甲基纤维素钠注入小烧杯中，用托盘天平量取3g硅胶，慢慢倒入小烧杯中，倒的时候要防止硅胶粉末飞溅所以一定要慢慢倒；用药匙轻轻搅拌，直到成为没有块状物的糊状，迅速将糊状物平铺在玻璃板上，为防止糊状物干掉所以应迅速；用药匙尽量将糊状物铺平，如果不平整将导致固相支持物薄厚不一，影响氨基酸前进速度，用手轻摇玻璃板使糊状物成为表面平整均一的膜；晾干尽量不用风吹，因为如果风吹得不均匀将导致硅胶涂层干的速度不一样表面产生斑痕；放到烘箱里活化至涂层完全变干，大概需要30分钟左右；用铅笔在距玻璃板底边2cm处画一条线，注意要轻，不能让笔尖彻底划破涂层；用毛细管在涂层画线的地方点样，样点要有一定距离，大概1cm，样点直径不超过2mm，防止样点交叉或拖尾；将薄层板点样一端浸入展层-显色剂，要防止将样点接触展层-显色剂，以免氨基酸溶解在其中；当展层剂蔓延至超过玻璃板中线后，取出薄板，用铅笔描出溶剂前沿界限；将薄板重新放入烘箱再次烘干，至薄板上显出各层斑点。 实验现象： 薄板上出现5处粉紫色的椭圆形斑点。 溶剂前沿 5．5cm 5.4cm 3cm 3cm 2.3cm 1.1cm 1.1cm Ala Arg Gly 混合液 原始实验数据： 样品 斑点-原点 溶剂前缘-原点 Ala 3cm 5.5cm Arg 1.1cm 5.5cm Gly 2.3cm 5.4cm 混合点1 1.1cm 5.5cm 混合点2 3cm 5.5cm 【实验报告第三部分（结果与讨论）：①结果（定量实验包括计算）：应把所得的实验结果（如观察现象）和数据进行整理、归纳、分析、对比，尽量用图表的形式概括实验的结果；②讨论：不应是实验结果的重述，而是以结果为基础的逻辑推论。③结论：简单扼要，说明本次实验所获得的结果。（包括思考题）。评分（满分45分）：XX】 实验结果： 样品 Ala Arg Gly 混合点1 混合点2 Rf值 0.545 0.200 0.426 0.200 0.545 讨论：Rf值和被测物质极