第十一章核酸的物理化学性质.pptVIP

第十一章 核酸的物理化学性质 核酸的杂交 （二）复性 变性核酸的互补链在适当的条件下，重新缔合成为双螺旋结构的过程称为复性。 DNA复性后，一系列性质将得到恢复，但是生物活性一般只能得到部分的恢复，具有减色效应。 将热变性的DNA骤然冷却至低温时，DNA不可能复性。变性的DNA缓慢冷却时可复性，因此又称为“退火”。 退火温度＝Tm－25℃ 复性影响因素 片段浓度/片段大小/片段复杂性（重复序列数目）/ 溶液离子强度 将热变性的DNA骤然冷却时，DNA不可能复性 DNA的片段越大，复性越慢 DNA的浓度越大，复性越快 在一定条件下，复性反应的速度用Cot 1/2来衡量，Co为变性DNA复性时的初始浓度，t为时间， Cot ?表示复性一半时的DNA浓度。 两种浓度相同但来源不同的DNA，复性时间的长短与基因组的大小有关 有很多重复序列的DNA复性也快 （三）核酸的杂交 DNA单链与在某些区域有互补序列的异源DNA单链或RNA链形成双螺旋结构的过程。这样形成的新分子称为杂交DNA分子。 核酸的杂交在分子生物学和遗传学的研究中具有重要意义。 Southern 杂交（Southern bolting） Northern 杂交（Northern bolting） Western 杂交 （Western bolting） 核酸分子杂交（DNA/DNA or