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专题九　生物技术实践 直击考纲1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.运用发酵加工食品的基本方法。4.制备和应用固相化酶。5.蛋白质的提取和分离。6.PCR技术的基本操作和应用。 1．判断下列有关传统发酵技术的叙述 (1)在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 (2012·江苏，21A)(　√　) (2)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在45 ℃处 (2010·北京，1AD)(　×　) (3)在果酒和果醋制作过程中，果酒的制作过程是在缺氧条件下，而果醋整个制作过程一直处于有氧条件下 (2010·江苏，7AC改编)(　×　) (4)与果醋、果酒制作相比，腐乳的制作所需要的适宜温度最高，所用菌种为乳酸菌 (2011·江苏，3AC)(　×　) (5)在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与，所用豆腐的含水量为70%左右，水分过多腐乳不易成形 (2008·江苏，17AB改编)(　√　) 2．判断下列有关微生物的培养与应用的叙述 (1)常用液体培养基分离获得细菌单菌落 (2012·大纲全国，5B)(　×　) (2)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 (2009·安徽，6A)(　√　) (3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法 (2011·新课标全国，39)(　√　) 3．判断下列有关酶的研究与应用的叙述 (1)多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 (2011·江苏，15D)(　×　) (2)CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 (2010·江苏，25B改编)(　√　) (3)利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件(2009·江苏，3C)(　×　) (4)利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物(2009·江苏，3D)(　×　) (5)固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显 (2009·江苏，3A)(　√　) 4．判断下列有关蛋白质技术的叙述 (1)蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA(2009·江苏，23C)(　×　) (2)蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化 (2009·江苏，23D)(　√　) (3)利用透析法纯化蛋白酶时，应以蒸馏水作为透析液 (2010·江苏，3C)(　×　) 重点一　微生物的利用 1．微生物的培养 (1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。 ①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 ②常用灭菌方法：灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具；干热灭菌——主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。 (2)如图为倒平板操作过程，操作时要待培养基冷却至50_℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。 制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。 (3)平板划线操作 (4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示： 2．培养基对微生物的选择作用 (1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 (2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 (3)培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物。 (4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。 (5)改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 技能点拨　 1．平板划线操作的注意事项 (1)每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 2．平板划线法中的“连续划线”及稀释涂布平板法中的“系列稀释”目的是一样的，都是为了保证菌种在培养基中单个分布(平板划线法中最后一次划线的末端处的菌种最纯)。 对位训练 1．(2013·新课标全国卷Ⅱ，39)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题： (1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用____________法或____________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。 (2)取该单菌落适当稀释，用__________法接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。 (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养