活力测定、细胞复苏探究.pptVIP

2．细胞活力测定 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。 用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。 细胞计数及活力测定 一、实验目的： 1．掌握细胞计数的方法 2. 掌握测定细胞活力的方法。 二、实验原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 三、实验材料 仪器、材料与试剂 1．仪器：普通显微镜、血球计数板、试管、吸管、分光光度计。 2．材料：细胞悬液。 3．试剂：0.4％台盼兰，0.5％四甲基偶氮唑盐（MTT）、酸化异丙醇 四、操作步骤 1．细胞计数 ①将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上。 ②将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。 ③静置3分钟。 ④计数 ：在低倍镜下计算计数板的四角大方格（每个大方格又分16个小方格）内的细胞数。数出计数板上计数室四角四大格中的细胞数，如细胞压在格线上时，数上不数下，数左不数右。 ⑤细胞浓度计算： 四大格的细胞总数除以4，得出平均每