新生鼠肠损伤时肝脏黄嘌呤氧化酶的变化.docVIP

世界华人消化杂志?2004年?10月15日;12(10):2486-2487 新生鼠肠损伤时肝脏黄嘌呤氧化酶的变化 芦惠,?王丽杰,?中国医科大学附属第二医院儿科??辽宁省沈阳市??110004项目负责人:?芦惠, 110004,?沈阳市和平区三好街36号,?中国医科大学附属第二医院儿科.??luhui66999@电话: 024???传真: 024收稿日期: 2004-07-20????接受日期: 2004-09-04摘要目的:?探讨新生鼠肠损伤时肝脏黄嘌呤氧化酶(XO)的变化.方法:?新生大鼠随机分为对照组8只，实验组每一时相点各8只.?将E coli?O55: B5脂多糖5 mg/kg?注入新生鼠胃内，分别于灌胃后3，6，12，24，72 h处死动物.?取部分肝组织固定，包埋，HE染色，光镜下观察其组织学改变.?其余肝组织用于测定XO活性.结果:?实验组6，12 h XO活性明显高于对照组(分别为4 719±793 nkat/g vs 3 961±387 nkat/g，4 929±477 nkat/g vs 3 961±387 nkat/g，P 0.05); 3，24，72 h XO活性与对照组无显著差异(P 0.05).?内毒素治疗后随着时间的进行逐渐出现中央静脉扩张，肝窦充血、炎性细胞浸润，肝细胞水肿，胞质疏松，空泡变性. 6，12 h可见大量肝细胞内出血，肝细胞坏死. 24，72 h肝细胞水肿渐消失，出血坏死不明显.结论:?新生鼠肠损伤时可致肝脏受累，且XO活性愈高，肝损伤愈重.芦惠,?王丽杰.?新生鼠肠损伤时肝脏黄嘌呤氧化酶的变化.?世界华人消化杂志??2004;12(10):2486-24870???引言坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)是新生儿期最常见的胃肠道疾病，可导致多器官功能衰竭[1].?肝脏是人体重要的免疫器官，在肠屏障功能受损时，作为第一道防线，一定程度上能抑制肠源性感染扩散，但其本身炎性细胞也可被激活，在倍增全身炎症反应的同时自身亦受到损伤[2].我们通过内毒素(lipopolysaccharide，LPS)建立新生鼠肠损伤模型，探讨肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase，XO)的变化及意义.1???材料和方法1.1?材料??健康1日龄Wistar新生大鼠，平均体质量6.3±0.9 g，由中国医科大学第二临床学院动物部提供.?随机分为对照组8只，实验组每一时相点(3，6，12，24，72 h)各8只.?将1.9F硅胶管(B-D?Inc，Sandy，UT，USA)经口插入胃内，E coli?O55: B5脂多糖(LPS;Sigma Chemical CO．，St．Louis，Mo) 5 mg/kg用无菌生理盐水稀释至0.2 mL注入胃内;?对照组则注入无菌生理盐水0.2 mL[3].?灌胃后各组均放回母鼠旁，继续哺乳，直至实验结束.动物处死后，分离肝脏.取肝组织于40 g/L多聚甲醛中固定，常规脱水，包埋切片，行HE染色，光镜下观察其组织学变化.?其余肝组织于－80?°C超低温冰箱中保存，以备检测.1.2?方法??肝组织XO活性测定，按测定试剂盒要求，应用紫外/可见分光光度计(法国500-P型)，测定肝组织匀浆XO活性.?同时按考马斯亮兰蛋白测定试剂盒说明测定每一样本的蛋白浓度.?试剂盒均购自南京建成生物工程研究所.? ????统计学处理??经SPSS 11.5 For Windows数据分析软件处理.?所有数据以mean±SD表示，组间比较采用配对t检验.?统计结果显著性以P 0.05表示.2???结果2.1?肝组织XO活性变化??实验组6，12 h肝组织XO活性(4 719±793 nkat/g，4 929±477 nkat/g)均明显高于对照组(3 961±387 nkat/g，P 0.05)，高峰在12 h; 24 h (4 481±473 nkat/g) XO活性下降，3(4 268±455 nkat/g)，24，72 h (3 994±605 nkat/g)肝组织XO活性与对照组无显著差异(P 0.05).2.2?肝组织形态学改变??对照组新生鼠肝小叶分界不清，肝板排列较成年大鼠差，胞质嗜碱性，门管区不清楚，但中央静脉清晰可见.?内毒素治疗后随着时间的进行，逐渐出现中央静脉扩张，肝窦充血、炎性细胞浸润，肝细胞水肿，胞质疏松，空泡变性. 6，12 h时可见大量肝细胞内出血，肝细胞坏死. 24，72 h时肝细胞水肿渐消失，出血坏死不明显.3???讨论NEC多见于新生儿.?早产、缺氧/缺血、肠道喂养和细菌增生是导致此病的主要危险因素[1,3-5]