淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测课件13.pptVIP

* * 比较项目 成分 条件 效果 普通洗衣粉 表面活性剂、水软化剂、芳香物质、增白物质 无特殊要求 去除污垢、油脂等，但去污力相对较弱，不易漂洗 加酶洗衣粉 以上物质 ＋酶类 适宜的温度、PH值 除去除污垢、油脂等外，还可以清除血、汗、油、色素和食物的汁液等，效果较好 添加的酶的种类：蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、　　 　　　　　　　　果胶酶、脂肪酶等 活性成分 　　活性成分就是洗涤剂中起主要作用的成分。洗涤活性成分是一类被称作表面活性剂的物质，它们含有疏水基团和亲水基团，在洗涤中起乳化和通透作用。它们可以减弱污渍与衣物间的附着力，在洗涤水流以及手搓或洗衣机的搅动等机械力的作用下，使污渍脱离衣物，从而达到洗净衣物的目的。 实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 实验目的： 1. 掌握α-淀粉酶的固定化 2. 检测固定化α-淀粉酶的效果 基础知识：酶的固定化技术 本节课重点 基础知识：酶的固定化技术 1.产生背景： 2.概念： 3.常用方法： 三个问题： 1、背景——酶制剂的生产 ①提取法 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来 缺点： 要有充足的原材料，广泛应用受到限制 ③发酵法——常用方法 定义： 通过微生物发酵获得所需要的酶。 优点： 易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。 ②化学合成法 缺点： 成本高、已知分子结构的酶 酶在应用过程中存在的问题 ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机 溶剂等条件非常敏感，容易失活 ②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提 高了生产成本 ③反应后，酶会混在产物中，影响产品质 量，难以在工业生产中广泛应用 在生产实践中如何克服上述缺点？ 固定化酶： 将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高，低耗能、低污染等 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量 固定化酶 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 直接使用酶和固定化酶的优缺点 2.固定化酶技术生产高果糖浆的图示： 把酶固定在反应柱上有何好处？ 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高果糖的产量和质量。 固定化酶：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。 3.酶固定化的常用方法： a、吸附法： 将酶吸附到固体吸附剂表面的方法， 物理吸附法 离子交换法 对蛋白质有高度的吸附能力、又不引起酶变性且能保持一定酶活性。如：活性碳、多孔玻璃、石英砂、有机硅等 固定化酶技术的优点： 举例：α-淀粉酶的固定化 利用蛋白质的两性性质，使其带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键，而被交换结合在交换剂上 固体吸附剂 酶 3 4 2 d、包埋法： 将酶包裹在多孔的载体中， 包埋成格子型或包埋成微胶囊型 c、交联法： b、共价偶联法 酶的某些基团与载体共价结合。稳定性好，酶蛋白不易脱落，但较难获得活性很高的固相酶。 利用双官能团或多官能团试剂与 酶之间发生分子交联来把酶固定 化的方法。 实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 实验目的： 1. 掌握α-淀粉酶的固定化 2. 检测固定化α-淀粉酶的效果 实验设备和材料：38页—39页 实验材料制备 5mmol/L KI-I2溶液 称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml。 a-淀粉酶的固定化 在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。再加入 5g石英砂，不时搅拌，30分钟后装入反应柱中。 用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱以除去未吸附的游离淀粉酶，流速控制为1ml/min。 可溶性淀粉溶液 取50mg可溶性淀粉溶于100ml热水中，搅拌均匀。 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 1.α-淀粉酶的固定化 吸附 5mgα-淀粉酶+4ml蒸馏水+5g石英砂，搅拌30min 装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中 用10倍柱体积的蒸馏水洗涤除去未吸附的游离淀粉酶 装柱 洗柱 固定化装置—反应柱 淀粉 α-淀粉酶 糊精 Β-淀粉酶 葡萄糖 糖化淀粉酶 麦芽糖 注意：这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶 其作用的最适温度为50-75℃；最适PH为5.5-7.5 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色 2.1实验原理： 2、淀粉水解的检测 指示剂？ 用吸附法将α-淀粉酶固