植株全磷的测定及土壤测试仪的应用.doc

植株全磷的测定及土壤测试仪的应用 土壤全磷量即磷的总贮量，包括有机磷和无机磷两大类。本文主要介绍全磷的一般检测方法，并介绍一下浙江托普仪器的TPY-II型土壤测试仪的应用。土壤中的磷素大部分是以迟效性状态存在，因此土壤全磷含量并不能作为土壤磷素供应的指标，全磷含量高时并不意味着磷素供应充足，而全磷含量低于某一水平时，却可能意味着磷素供应不足。 一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法） 1 H2SO4—H2O2消煮原理 植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2 ，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。 2 主要仪器： 开氏瓶（50ml）或消煮管、150mL三角瓶；万分之一电子天平、电热板或普通电炉等；定氮仪等。 3 操作步骤 称取烘干、磨细的植物样品(过0.25 mm筛)0.3000g~0.5000g，置于50mL开氏瓶（或消煮管）中（勿将样品粘附在瓶颈上），先滴入少量水湿润样品，加浓硫酸8mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度。消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下开氏瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30 %H2O210滴，并不断摇动开氏瓶。再加热(微沸)约5 min，取下，稍冷后重复滴加30 %H2O2 5~10滴，再消煮。如此反复进行3~5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5~10min（以赶尽剩余的H2O2 )，取下开氏瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入开氏瓶中。将消煮液无损地洗入100 ml容量瓶中，用水定容，摇匀。过滤或放置澄清后供氮、磷、钾测定。 4 注意事项： （1）消煮开始时火要小； （2）加H2O2 时要等器皿少冷后，提起小漏斗，直接将H2O2 滴入溶液中； （3）消煮要彻底。消煮好的标志是：溶液呈无色或清亮色； （4）消煮液最后要赶尽H2O2 。否则会影响氮、磷的比色测定。方法是消煮液呈清亮色后再煮5-10分。也可观察液面的波动，赶尽H2O2后液面比较平静。 二、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法） 1、方法原理 在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸。溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关，所以，可用比色法测定溶液中磷的含量。 2、主要仪器、试剂 （1）主要仪器：50mL容量瓶； 722或723型分光光度比色计等。 （2）试剂 6mol/LNaOH溶液（24g NaOH溶于水，稀释至100ml） 0.2%二硝基酚指示剂（0.2g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中） 磷标准液50mg/L P（0.2195g干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水，加入5ml浓H2SO4，于1L容量瓶中定容，装入塑料瓶中低温保存。 钒钼酸铵试剂： A液：将25.0g的钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O，分析纯］溶于400mL水中。 B液：将1.25g的偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后，加入250mL浓硝酸(分析纯)，冷却至室温。 将A液缓缓注入B液中，不断搅匀，加水稀释到1L，贮入棕色瓶中。 3、测定步骤 吸取消煮好的待测液5.00～10.00 mL（含P 0.05~1.0mg）置于50ml容量瓶中，加2,6-二硝基酚（或2,4-二硝基酚)指示剂2滴，用6mol·L-1NaOH 调pH至刚显黄色，准确加入钒钼酸铵试剂10.00mL，用水定容，摇匀。同时做空白实验。15min后，用分光光度计在450nm处比色，以空白液调节吸光值的零点。 ??? 标准曲线制作：准确吸取50ug·mL-1的P标准溶液0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0mL，于50mL容量瓶中，加与吸取的待测液等量的空白消煮液，同上述操作步骤显色和比色。该标准系列P的浓度分别为0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0 ug·mL-1 P。 4、结果计算 植株全P(%)=ρ·V×分取倍数×10-4 /m ?式中：ρ——从标准曲线查得显色液P的质量浓度(ug/mL) ?????? V ——显色液体积(mL) ?????? m ——烘干样品质量（g） 10－4—将ug/L浓度单位换算为百分含量的换算因数 5、注意事项 显色液的酸度要求在0.04~1.6mol.L -1H+ 内，酸度过高时，显色不完全或不显色，酸度太低时则可能生成沉淀或其它物质的颜色