耐盐的地衣芽孢杆菌WX-02的分离及氯化钠在产量和分子水平对聚谷氨酸的别构调节概要.docVIP

应用生物化学生物℃的条件下使用带有R20V转子的Himac CR21G离心机（日本，东京，日立）将从液体培养基中分离的细胞进行离心。细胞干重是通过在80℃的条件下把细胞进行风干到一定的恒量来测定的。 聚谷氨酸的提纯 聚谷氨酸的提纯和重新获得是根据Do等人的方法来操作的。在液体培养基的PH值下降到3时将被分离的细胞在9540个重力单位的条件下使用带有R20V转子的Himac CR21G离心机离心15分钟。上清液用NaOH溶液中和，倒入4升的乙醇中，然后在4℃条件下混合并保存12小时，接着在9540个重力单位下离心10分钟。沉淀溶于蒸馏水中，其他不溶的成分通过在13700个重力单位下离心10分钟去除。聚谷氨酸（分子量降低为3500）原溶液通过在蒸馏水中渗析24小时然后冻干用来制备纯净的聚谷氨酸。 聚谷氨酸的测定 聚谷氨酸根据报道的方法进行分析[18,19]。纯净聚谷氨酸可以在6 mol/L HCl和110℃的条件下24小时能水解。水解液用6 mol/L NaOH中和，水解液中大量的谷氨酸盐是由安捷伦1100高效液相色谱仪(25 cm×4.6 mm, 美国安捷伦技术有限公司）利用C18硅胶进行测定的。10毫摩尔每升KH2PO4加上5.0%甲醇（PH2.5）作为流动相，流速为1.0 ml/min。以规范的标准通过一定保留时间，谷氨酸盐被证实是水解液中唯一的产物，聚谷氨酸的产