化妆品中15种抗组胺-中国食品药品检定研究院.doc

附件3 化妆品中地氯雷他定等15种物质的检测方法 （征求意见稿） 1 范围 本方法规定了采用高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中地氯雷他定等15种物质的含量。 本方法适用于膏霜、乳液、水剂和啫喱等类型化妆品中地氯雷他定等15种物质的含量的测定。 本方法所指的15种物质为地氯雷他定、氯苯那敏、阿司咪唑、曲吡那敏、溴苯那敏、苯海拉明、异丙嗪、羟嗪、奋乃静、西替利嗪、氟奋乃静、氯丙嗪、氯雷他定、特非那定和赛庚啶。 2 方法提要 以甲醇为溶剂提取化妆品中抗组胺类物质，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量μm滤膜过滤。 3.5 标准品，参考附录A。 3.6标准储备溶液（ρ=1 g/L）：分别准确称取15种抗组胺标准品各10 mg（必要时需折算），精确到0.0001 g0 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容。 3.7 混合标准储备溶液（ρ=2.5 mg/L）：准确移取各标准储备液25 μL至10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容。 4 仪器和设备 4.1高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪0.22 μm滤膜。 4.4 离心机，10000 r/min。 4.5 涡旋振荡器。 4.6 天平用（3.1）稀释混合标准储备溶液，精密配制得浓度为，，，，g /mL的系列浓度标准溶液。精确至0.001g000 r/min离心5 min。取上清液经0.22 μm滤膜过滤，滤液作为试样溶液备用。必要时用适量甲醇（3.1）稀释滤液备用。 5.3参考色谱-质谱5.3.1 色谱条件 色谱柱： 烷基硅烷键合硅胶色谱柱 ( μm, 3.0×150mm)。 流动相：溶液A：，溶液B：（），梯度程序柱温：3；进样量：2 μL5.3.2 质谱条件 离子源： 电喷雾离子源（ESI源）； 监测模式： 正离子监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表： L/min； 干燥气流速： L/min； ：50 ℃；；编号 物质名称 母离子（m/z） 子离子（m/z） CE（V） 1 * 22 294.1 18 2 氯苯那敏 275.1 230.1* 15 167.1 42 3 阿司咪唑 459.3 135.1* 38 218.1 26 4 曲吡那敏 256.2 211.1* 14 91.1 35 5 溴苯那敏 319.1 273.9* 18 167.0 43 6 苯海拉明 256.2 167.1* 13 165.0 45 7 异丙嗪 285.1 86.2* 20 198.0 22 8 羟嗪 375.2 201.0* 20 166.1 39 9 奋乃静 404.2 171.1* 24 143.2 29 10 西替利嗪 389.1 201.0* 20 166.1 41 11 氟奋乃静 438.2 143.1* 31 171.1 25 12 氯丙嗪 319.1 86.2* 21 58.0 41 13 氯雷他定 383.1 337.0* 22 267.0 36 14 特非那定 472.3 436.3* 26 454.3 20 15 赛庚啶 288.2 96.2* 27 191.0 27 *：定量离子对 5.4 定性判定 用液相色谱-串联质谱法对样品进行定性判定在相同试验条件下，样品中应呈现定量离子对和定性离子对的色谱峰，被测物质的峰保留时间与标准溶液对应的保留时间一致样品所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子对相对丰度比的偏差不超过表定范围，则可以判样品中存在对应的禁用物质。表定性时离子相对丰度的最大允许偏差 离子相对丰度（k） k≥50% 50 % k ≥ 20 % 20 % k ≥ 10 % k≤ 10 % 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 5.5 定量测定 在分析条件下，，其线性相关系数应0.99。取溶液进样，峰面积代入，按项下公式，计算样品中的。 式中： ω——样品中抗组胺类物质的含量，ng/g； ρ——试样溶液中抗组胺类物质的浓度，ng/mL； V——样品定容体积，mL； m——样品取样量，g。 D——稀释倍数（如未稀释则为1）。 条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的15 %。 6.2 回收率和精密度 多家实验室验证 图1标准品标准溶液HPLC-MS/MS参考色谱图 附录A 资料性附录 表A 标准品信息表 序号 标准品 分子量 纯度要求 CAS No 分子式 折算系数 1 地氯雷他定 310.83 ≥98% 100643-7