酵解反应现在让我们按顺序考虑上图中的反应。在给出反应.ppt

* 酵解反应 现在让我们按顺序考虑上图中的反应。在给出反应式时，写出全称。在讲述时，为了简化，只说短名。如，我们说6-磷酸葡萄糖是指α-D-6-磷酸葡萄糖。 反应1： 第一个ATP的投入 葡萄糖被ATP磷酸化形成6-磷酸葡萄糖（G-6-P）。 △G°′=-16kJ/mol 这是一个耗能反应。 催化这个反应的酶有己糖激酶和葡萄糖激酶。 a)己糖激酶以六碳糖为底物，其专一性不强，不仅可以作用于葡萄糖，还可以作用于D-果糖和D-甘露糖。 己糖激酶像其他激酶一样，需要Mg++或其他二价金属离子，如Mn2+所活化。实际上Mg++与ATP形成的复合物才是酶的真正底物。 X-晶体衍射研究表明，在己糖激酶催化反应时有构象变化，其变化大致是，酶与葡萄糖结合时，结合裂缝两侧的酶叶关紧，糖被酶蛋白环绕造成非极性环境，从而促使ATP的磷酰基转移，防止水作为底物攻击ATP。这种底物诱导的裂缝关闭现象是激酶的共同特性。 己糖激酶是一个别构酶，被其产物G-6-P强烈抑制。它催化的反应是酵解中第一个调节步骤。 b)葡萄糖激酶 葡萄糖激酶存在于肝细胞中。它对D-葡萄糖有特异活性，不被G-6-P所抑制。 肌肉己糖激酶对D-葡萄糖的Km值为0.1mmol/L，肝葡萄糖激酶的Km约为10mmol/L。细胞内葡萄糖浓度通常为5mmol/L，此时己糖激酶的酶促反应已达最大速度，而葡萄糖激酶仍不活跃。只有当进食后，肝细胞内葡萄糖浓度高时葡萄糖激酶才起作用，将葡萄糖转化为G-6-P，再以糖原形式贮存于细胞中。 葡萄糖激酶是一个诱导酶，由胰岛素促使其合成。 100 75 相对反应速度，Vmax% 反应2. 6-磷酸葡萄糖的异构化 醛糖6-磷酸葡萄糖转化成酮糖6-磷酸果糖（F-6-P）。 +1.68kJ/mol 这个同分异构化反应由葡萄糖异构酶催化。 反应需要Mg++，形成一个烯醇中间物。羰基氧从碳1转移到碳2，其作用是在碳1产生的羟基更容易在下一个反应中磷酸化。 由于此反应标准自由能变化很小，反应是可逆的。反应方向由底物和产物的量来控制。 反应3．第二个ATP的投入 F-6-P磷酸化成1，6-二磷酸果糖（F-1,6-2P） 这个反应由磷酸果糖激酶催化，将ATP上的磷酰基转移到F-6-P的C1位置上形成F-1,6-2P。 这一步反应是酵解中的关键反应步骤，反应是放能的，在体内是不可逆的。磷酸果糖激酶是酵解限速酶。 磷酸果糖激酶是分子量为360000的四聚体。它是一个别构酶，ATP，柠檬酸，脂肪酸对此酶有抑制效应。AMP，ADP或无机磷可消除抑制，增加酶的活性。 反应4．两个磷酸三碳糖的形成 F-1,6-2P裂解成3-磷酸甘油醛(G3P)和磷酸二羟丙酮（DHAP）。 F-1,6-2P在1,6-二磷酸果糖醛缩酶的催化下在C3和C4之间的键断裂，产生两个三碳糖，一个酮糖，磷酸二羟丙酮，一个醛糖，3-磷酸甘油醛。 1,6-二磷酸果糖醛缩酶催化的反应△G0’为+24kJ/mol，反应易于向左进行，这是醛缩酶名称的由来。凡是连接两个羰基化合物，例如一个醛和一个酮化合物形成一个醛醇化合物就是醛缩反应。 在正常生理条件下，由于3-磷酸甘油醛不断转化成丙酮酸，大大降低了细胞中3-磷酸甘油醛浓度，从而驱动反应向裂解方向进行。 醛缩酶活性部位的赖氨酸和底物之间形成的希夫碱(Schiff base) 中间物 Dihydroxyacetone phosphate 磷酸二羟丙酮 Schiff base 希夫碱 H H H 1，6-二磷酸果糖 3-磷酸甘油醛 醛缩酶 醛缩酶的反应机理是酶的活性中心上特殊的赖氨酸上的ε氨基与磷酸二羟丙酮上的羰基形成一个四面体中间物，然后去水变成质子化的Schiff碱又称酮亚胺，它促使磷酸二羟丙酮形成烯醇化的负碳离子，与3-磷酸甘油醛形成质子化的Schiff碱，F-1,6-2P酮亚胺，然后再去质子化和水解除去Schiff碱产生F-1,6-2P和酶。1,6-二磷酸果糖的裂解就是这个反应的逆转。 反应5．磷酸三碳糖的同分异构化 磷酸三碳糖中只有3-磷酸甘油醛能继续进入酵解途径。磷酸二羟丙酮可在磷酸丙糖异构酶的催化下迅速转化成3-磷酸甘油醛。 己糖转化成三碳糖后，碳原子顺序数颠倒，己糖原来的碳原子数C3和C4是3-磷酸甘油醛的C1; C5和C2变成C2；C1和C6变成C3。 上述酵解的前5步反应是耗能阶段，共消耗2分子ATP。后面的5步反应则为产能阶段。 3 反应6．第一个高能化合物的合成 3-磷酸甘油醛氧化成3-磷酸甘油酸磷酸，或称1，3-二磷酸甘油酸。 3-磷酸甘油醛在有NAD+和H3PO4时，被磷酸甘油醛脱氢酶催化形成1，3-二磷酸甘油酸。 这个反应既是氧化反应又是磷酸化反应。如果要将磷酸甘油醛C1醛基上的氢质子和电子移去，有很