ld菊花的组织培养课稿.ppt

* * * 生长素和细胞分裂素的比例不同将导致植物细胞的发育方向不同。 * 生长素和细胞分裂素的比例不同将导致植物细胞的发育方向不同。 * * 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子 * * 针对于多数植物 * * 4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种. ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件. ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分. A.注意无菌操作 B.不要倒插茎段 C.每瓶中接种6～ 8块外植体 你打算做几组重复？ 你打算设置对照实验吗？ 每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的空白锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 无菌箱中培养； 培养期间应定期消毒； 培养温度18~22℃； 每日用日光灯光照12h 锥形瓶放在培养架上培养 形成愈伤组织 丛状苗 丛芽培养基上培养 生根培养基上培养：生出根 （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日. 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间. 3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中. 固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培. （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花. （5) 接种时插入的方向？ （6）接种后的锥形瓶放在何处培养?培养过程中是否需要更换培养基？ （4）外植体消毒酒精的浓度和氯化汞的浓度？原因？ 实验操作特别注意事项（考点密集） （1）配制母液时，浓缩的倍数？ （2）配制培养基时蔗糖的作用？ （7）幼苗先移栽在何处再移栽到土壤中？ （3）菊花的组织培养茎段的选择？是否添加激素？ 植物组织培养所利用的植物材料体积小、 抗性差，对培养条件的要求较高： 用于植物组织培养的培养基同样适合于 某些微生物的生长，消耗了营养物质； 微生物产生的代谢废物会毒害培养的对象。 因此要进行严格的无菌操作。 为什么要进行无菌操作： 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 4、无菌箱中的培养； 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 三、结果分析与评价 污染的主要途径 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 四、课题延伸 (1)培育无病毒植株 (2)培养紫草愈伤组织，提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料） (4)基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 2、植物组织培养的应用： (3)诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题. 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化 营养 MS固体培养基制备 课堂小结 外植体消毒 接种 栽培 移栽 栽种 细胞全能性 组织培养过程 激素 环境条件 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞表现出全能性的必要条件是（ ） A．给予适宜的营养和外界条件B．导入其他植物细胞的基因C．脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件D．将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 C 随堂检测 观看视频 碳源 渗透压 添加植物激素，提供大量的无机盐。 高压蒸汽灭菌 0.1%的氯化汞 污染率 存活率（或死亡率） 9 应提高NAA的浓度，重新配置培养基转瓶培养。 扦插 嫁接 压条 营养繁殖 在植物组织培养中， 切取胡萝卜的外植体时一般选择（ ） A．具有木质部的部分　　　　 B．具有韧皮部的部分 C．具有形成层的部分 D．具有髓的部分 解析：分裂能力越强的细胞全能性越强，形成层是分生组织，在各选项中是分裂能力最强的细胞。 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。 植物组织培养简介 发展简史 1838-1839年，德国科学家Schle