发酵菌的物质需求.pptVIP

酪蛋白水解产生的脂肪酸，作为碳源与能源，是迟效碳源 不同工程菌利用碳源的能力不同。 葡萄糖优先利用会造成培养基的酸化，在发酵控制中是一个值得注意的问题。 氮源 为工程菌生长主要提供氮素来源，如氨基酸和蛋白质、核苷和核酸及其他含氮物质。 工程菌可直接很好地吸收利用无机氮如氨水、铵盐等，一般不能利用硝态氮，因为缺乏把NO3－转化成NH4＋的酶体系。 几乎都能利用有机氮源如蛋白胨、酵母粉、牛肉膏、黄豆饼粉、尿素等。 不同工程菌对氮源利用能力差异很大，具有很高的选择性。 有机氮源的利用程度与细胞是否产生分泌相应的降解酶有关，能分泌大量的蛋白酶，降解蛋白胨等，然后吸收利用。 氨基酸 氨基酸是蛋白质和酶的组成单位。 氨基酸还参与合成一些含氮化合物，核苷酸的四种嘌呤和嘧啶碱基、儿茶酚胺等含氮激素及神经递质等。 氨基酸可通过生糖或生酮途径转变为糖或脂肪酸，间接提供能量。 氨基酸代谢特点： 吸收谷氨酰胺后，进入氨基酸代谢途径，通过脱氨、转氨等作用，合成其他必需和非必需氨基酸。 大多数谷氨酰胺在脱氨酶催化下，生成谷氨酸，并释放氨，对细胞产生毒性。 小部分谷氨酰胺通过转氨生成其他嘌呤、嘧啶和氨基糖等合成代谢的前体。 谷氨酸还原酶把谷氨酸转化为中间产物α-酮戊二酸，进入三羧酸循环，为细胞提供能量。所以谷氨酰胺在细胞能量代谢中具有重要作用。 谷氨酰胺与丙酮酸和草酰乙酸发生转氨作用，生成丙氨酸和天门冬氨酸，丙氨酸可进入培养液并积累。在快速生长的动物细胞培养体系，转氨作用是主要的代谢途径。 维生素 维生素是一类微量的小分子有机生物活性物质，对代谢和生长起调节和控制作用。 水溶性维生素包括B族维生素和维生素C。 B族维生素以辅酶或辅基形式参与酶反应，主要调节酶活性和代谢活性。 维生素C，抗坏血酸，在体内参与还原反应、羟化反应，促进胶原蛋白合成和粘多糖合成，抗氧化作用。 脂溶性维生素包括维生素A、D、E、K四种。 维生素A维持正常视觉和上皮组织。 维生素D为视固醇类化合物，主要是调节钙磷代谢。 维生素E即生育酚，是抗氧化剂，防止生物膜中磷脂的不饱和脂肪酸被氧化。 维生素K，促进合成凝血酶原，促进血液凝固。 无机盐 磷、硫、钾、钙、镁、钠等大量元素和铁、铜、锌、锰、钼等微量元素的盐离子，为工程菌生长提供必需的矿物质。 无机盐是细胞代谢所需的酶的辅基，同时保持细胞的渗透压和缓冲pH的变化。 磷是核苷酸和核酸的组成元素，磷脂等的组成成分。 硫是氨基酸和蛋白质组成元素， 钙参与细胞的信号传导过程。 矿物质还参与细胞结构的组成、酶的构成和活性、调节细胞渗透压、胞内氧化还原电势，具有重要的生理功能。 Na＋和Cl－参与生理电活动，维持水平衡、保持渗透压和酸碱平衡。离体培养为细胞提供足够的Na和Cl离子是基本条件， Ca2＋、Mg2＋，对细胞间的互黏稳定起重要作用。在离体培养时，螯合细胞间的Ca2＋和Mg2＋，可以达到分散细胞的目的。 K＋、Cl－等在维持酸碱平衡具有重要作用。 生长因子 指维持细胞生长所必需的微量有机物，不起碳源和氮源作用。生长因子包括维生素、氨基酸、嘌呤或嘧啶及其衍生物、脂肪酸等。由于蛋白胨等天然成分含有各种生长因子，一般在工程菌的培养基中不单独添加。 细胞因子有表皮生长因子、成纤维细胞生长因子和神经细胞生长因子，根据不同细胞添加。 * 碳源包括糖类、有机酸、脂类和蛋白质类 一、发酵菌的物质需求 碳源 糖代谢特点： 细胞吸收葡萄糖后，进行糖酵解，大部分葡萄糖分解为丙酮酸，进一步被还原为乳酸，乳酸分泌到胞外并在培养液中积累。 葡萄糖代谢旺盛，会产生大量的乳酸，对细胞产生毒性。 丙酮酸还可转化为乙酰辅酶A，进入三羧酸循环，彻底氧化产生CO2和水。小部分（4％～8％）葡萄糖进入戊糖磷酸途径，把葡萄糖转化为4、5、7碳糖和还原力NADPH，5碳糖用于核酸合成，其他中间产物进入脂肪酸代谢、核酸代谢和氨基酸代谢。 * * * 大肠杆菌能利用蛋白胨、酵母粉等蛋白质的降解物 酵母只能利用葡萄糖、半乳糖等单糖类物质 真菌不仅可以利用单糖，还能利用多糖如淀粉等 大肠杆菌等以蛋白胨为碳源发酵中，添加低浓度的单糖如葡萄糖、果糖、半乳糖和双糖如蔗糖、乳糖、麦芽糖及其他有机物如甘油等对菌体生长具有促进作用。但高浓度表现出底物抑制作用。 大肠杆菌、酵母等能利用大分子有机氮源，常用蛋白胨等作为培养基的成分。 细胞之间是相互联系的，而非孤立的。特别是高度分化功能的动物细胞更是如此。 细胞离体生长时，必要添加激素与细胞生长因子等。 胰岛素是最常用的激素，促进糖原和脂肪酸的合成，对细胞的生长有刺激作用。 其它激素有促卵泡激素、甲状腺素、乳激素、生育酚等。 细胞因子有表皮生长因子、成纤维细胞生长因子和神经细胞生长因子，根据不同细胞添加。 为了细胞的贴壁生长，