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微生物总数检测方法（细菌）
微生物总数检测方法（真菌）
检测用培养基配方与培养条件
培养基：马铃薯葡萄糖琼脂（PDA培养基）
配制：以北京路桥PDA培养基为例，按说明上配制需称取培养基3.8克，加水100毫升。
2. 培养条件：24℃-26℃；时间：72-96小时。
二、检测与计数方法
1. 系列稀释
称样量：50亿/g 10g; 100亿/g 5g;
加入带玻璃珠的三角瓶中，加入100mL的无菌水（无菌水中事先加入了分散剂1—2滴，分散剂可以是吐温，OP—10，用来分散菌团），用玻璃棒搅拌使之溶解吸水均匀后，上旋转式摇床200 r/min充分振荡60 min，,即成母液菌悬液（基础液）。
2. 用1mL无菌移液管分别吸取1.0mL上述母液菌悬液加入9 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
3. 加样及培养
1个适宜的稀释度，用移液枪吸取菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。此稀释度重复3次，同时以空白作对照，于适宜的条件下培养。
4. 菌落识别
5. 菌落计数
20—150个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数目和杂菌数目。有效菌平均菌落数在20—150之间时，则以该菌落数计算。
有效活菌数按式（1）计算，同时计算杂菌数：
nm = kv1/(m0v2) ×10-8?? 或? nv = kv1/(v0v2) ×10-8 ????（1）
式中：
nm — 质量有效活菌数，???????? 亿/g
??????nv — 体积有效活菌数，????????亿/mL
??????— 有效菌落平均数，???????? 个
k — 稀释倍数
v1 — 基础液体积，???????????? mL
v2 — 菌悬液加入量，?????????? mL
v0 — 样品量，?????????? ??????mL
m0 — 样品量，???????????????? g
重点需要注意的部分在菌悬液的制备及震荡过程上，因为固态发酵的的产品大部分为聚集状态不容易分散开来，这点与液态发酵产品不同。所以：
悬液中要加分散剂分散菌团；
震荡时间也要较液态发酵产品时间长，使用旋转式摇床控制在180——200r/min，时间为60min 。
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