第六章DNA损伤与修复.pptVIP

一、DNA分子的自发性损伤 (一) DNA复制产生误差 如 大肠杆菌 碱基配对的错误率为10-1～10-2 复制后经校正系统校正，错配率为10-9左右 2. 碱基的脱氨基作用 碱基的环外氨基有时会自发脱落，从而胞嘧啶(C)变成尿嘧啶(U)，腺嘌呤(A)变成次黄嘌呤(H)、鸟嘌呤（G）变成黄嘌呤(X)等。复制时,U与A配对、H和X都与C配对就会导致子代DNA序列的错误变化。 3．脱嘌呤与脱嘧啶 即碱基脱落，是指从DNA上丢失了嘌呤或嘧啶，形成无碱基位点，称为AP部位（apurine, apyrimidine site, AP）。 4．碱基修饰与链断裂 细胞在正常生理活动中产生的活性氧会造成DNA损伤，产生胸腺嘧啶乙二醇、羟甲基尿嘧啶等碱基修饰物，还可引起DNA单链断裂等损伤。 二、物理因素引起的DNA损伤 (二)电离辐射引起的DNA损伤 电离辐射损伤DNA有直接和间接的效应，直接效应是DNA直接吸收射线能量而遭损伤；间接效应是指DNA周围其他分子(主要是水分子)吸收射线能量而产生具有很高反应活性的自由基，进而损伤DNA。 　三、化学因素引起的DNA损伤 四、DNA损伤的后果 1. E.coli 错配修复机制 GG-NER 和TC-NER的共同修复通路 同源重组修复DNA双链断裂 非同源末端连接修复DNA双链断裂 六、 SOS修复 SOS修复存在于大肠杆菌，不存在于人类。 SOS修复不很严格，新合成的DNA容易造成错误产生突变。 七、 线粒体DNA损伤和修复 哺乳动物的每个细胞中含有2—100 个线粒体，每个线粒体有5—10 mtDNA 分子，mtDNA 只占细胞中DNA 总量的10%。人mtDNA 是独立于细胞核染色体外的基因组，为环状双链DNA 结构，全长为16569bp。 一般认为线粒体基因组DNA突变与人类的衰老、进化、神经退行性病变、糖尿病和恶性肿瘤等有关。 线粒体DNA的氧化损伤: 单链断裂、双链断裂、碱基修饰、DNA交联、烷化损伤 线粒体DNA的损伤修复： 碱基切除修复、错配修复、重组修复 着色性干皮病(Xeroderma pigmentosis) 是一种隐性遗传性疾病，该病是由于患者对紫外线照射造成的核苷酸损伤切除修复缺陷所致。临床以光暴露部位色素增加和角化及癌变为特征。 着色性干皮病患儿脸部特征 着色性干皮病的治疗 避免紫外线照射 避免肿瘤致病因子 对症治疗 四、核苷酸切除修复 （nucleotide excision repair） 体内识别 DNA 损伤最多的修复通路。 不识别任何特殊的碱基损失，而是识别 双螺旋形状的改变；修复时切除含有 损伤碱基的那一段 DNA。 以大肠杆菌为例 UvrA:识别损伤部位 UvrB:解旋双链 紫外线诱导uvrA、uvrB、uvrC和uvrD四种基因表达 UvrC: 5ˊ末端内切 UvrB: 3ˊ末端内切 UvrD: 解旋酶 global genome NER（以人为例） 转录偶联修复 (TC-NER) 五、重组修复 根据 DNA 末端连接需要的同源性分为: 同源重组修复：需要多种蛋白参与,在 S/G2期起主要作用。 非同源末端连接修复：DNA分子之间不需要广泛的同源性，在G1/G0期起主要作用。 RecA-P的三种功能 a、 DNA 重组活性 b、 与S.S. DNA结合活性 c、 proteinase活性 当DNA正常复制时, RecA-p不表现proteinase活性 当DNA复制受阻 细胞内原少量表达的RecA-p 与S.S.DNA结合 激活RecA-p的proteinase活性 修复损伤 LexA-p降解 RecA-p高效表达 SOS open 当DNA复制度过难关后 RecA-p很快消失 LexA gene on SOS off 八、基因的损伤与修复异常所致的疾病 * * 第六章 DNA损伤与修复 哺乳动物细胞DNA损伤的发生频率 DNA损伤类型 次·细胞- 1 ·天 – 1 单链损伤 55 000 脱嘌呤 10 000 脱嘧啶 200 O6甲基鸟嘌呤 3 100