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第三章 免疫球蛋白分子—抗体 第一节 抗体的发展及其特征 一、抗体的发现 血清中存在一种能特异性中和外毒素的组分称为抗毒素，使细菌发生特异性凝集的组分称之为凝集素。其后将其称为抗体（antibody，Ab），将能刺激机体产生抗体的物质称为抗原（antigen）。 二、抗体的理化性质 40年代初期Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。 图1. 兔血清电泳分离 图2.不同类免疫球蛋白的电泳分离 离心常数7Sγ (16, IgG) ; 19S,β2(β2M,90,IgM); β2A(IgA) 三、抗体的生物学活性 抗体与抗原的特异性结合。 抗体与补体的结合。 抗体的调理作用。 第二节 免疫球蛋白的分子结构与功能 一、免疫球蛋白的基本结构 Porter对血清IgG抗体的研究证明，Ig分子基本结构是由四个肽链组成的，二条较小的轻链和二条较的重链，轻链与重链是由二硫键连接形成，分为氨基端（N端），羧基端（C端）。 （一）轻链和重链 1．轻链（light chain，L链） 214氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量为24KD，有两个由链内二硫键组成的环肽，可分为：Kappa（κ）与lambda（λ）2个亚型。 2．重链（heavy chain，H链） 450-550氨基酸残基组成，分子量55或75KD，含糖数量不同，4-5个链内二硫键，可分为5类，μ、γ、α、δ、ε链，不同的H链与L链（κ或λ）组成完整的Ig分子。 分别称为：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE。 （二）可变区和恒定区 1．可变区（Variable region，V区） L链N端 1/2处（VL）108-111个氨基酸残基， H链N端1/5-1/4处（VH）118个氨基酸残基， V区有一个肽环 65-75个氨基酸残基。 高变区（hypervariable region, HVR） 可变区 骨架区（framework region, FR） VL的HVR在24-34，50-56，89-97氨基酸位置。 VH的HVR在31-35，50-56，95-102氨基酸位置。 分别称为VL和VH的HVR1，HVR2，HVR3。 高变区为抗体与抗原的结合位置，称为决定簇互补区（complementarity-determining region, CDR），VL和VH的HVR1，HVR2，HVR3又分别称为CDR1，CDR2，CDR3，其中CDR3具有更高的高变程度，H链在与抗原结合中起重要的作用。 2．恒定区（constant region，C区） L链C端1/2处，105个氨基酸， H链C端3/4-4/5处，331-431个氨基酸。 在同一种属动物中是比较恒定的,是制备第二抗体进行标记的重要基础。 （三）功能区 链内二硫键折叠成球形区称为功能区（domain）约由110个氨基酸组成。氨基酸的顺序具有高度的同源性。 L链功能区： 2个，（VL，CL各一个） H链功能区： IgG，IgA，IgD，4个（V区1个，C区3个） IgM，IgE，5个（V区1个，C区4个） 功能区的作用： VL和VH是抗原结合的部位（FV区）。 CL和CH上具有同种异型的遗传标记。 CH2具有补体结合点。 CH3具有结合单核细胞，巨噬细胞，粒细胞，B细胞， NK细胞，Fc段受体的功能。 铰链区（hinge region） 位于CH1和CH2之间为非独立功能区。 当VL，VH与抗原结合时，此区发生扭曲，使抗体分子上两个抗原结合点更好地与两个抗原决定簇发生互补。 因CH2和CH3构型变化，显示出活化补体，结合组织细胞等生物学活性。 （四）J链和分泌成分 J链（joining chain）： 存在于IgA，IgM中，在其组成和体内转运中具有一定作用。 分泌成分（secretory component，SC）： 分泌成分是IgA上的一个辅助成分，对抵抗外分泌液中的蛋白水解酶的降解具有重要作用。 （五）单体，双体，五聚体 单体：由一对L链和H链组成的基本结构 双体：分泌型的IgA由J链连接的两个单体 五聚体：是由J链和二硫键连接的五个单体 IgG IgA IgM （六）酶解片段 1．木瓜蛋白酶（papain）水解片段 裂解部位，铰链区H链间二硫键（N端） 裂解片段，2个Fab（54KD），一个Fc（50KD） Fab与抗原结合，不发生凝集反应。 2．胃蛋白酶（pepsin）水解片段 （1）裂解部位，铰链区H链间二硫键（N端） 裂解片段，F（ab’）2，无Fc片段 与抗原结合可发生凝集反应 二、免疫球蛋白的分子