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(5)如何利用afp基因,通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株?在运用转基因香蕉的过程中,在生态安全方面可能会出现什么问题?(列举两点) _________________________________。 (6)从细胞工程的角度出发,简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。另外,抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期,请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。 _________________________________。 【解析】 本题考查对细胞工程、基因工程及蛋白质工程等现代生物科技内容的掌握、对转基因生物的安全性问题的理解;考查合理运用现代生物科技手段解决自然界和社会生活中的生物学问题。(1)香蕉是三倍体、高度不育,只能通过组织培养,培育人工种子进行繁殖。(2)植物的茎尖、根尖不带病毒,可通过茎尖、根尖组织培养的方式获得脱毒幼苗。(3)检测BBTV的方法见答案。 (4)影响DNA提纯的因素及依据见答案。(5)转基因香蕉在生态安全方面可能出现的问题见答案。(6)用细胞工程的方法培育抗寒香蕉品种,应该采用体细胞融合技术,让不同品种的体细胞进行融合,杂种细胞通过组织培养获得新个体,从中筛选出所需类型。 【答案】 (1)选取香蕉外植体,通过诱导脱分化产生愈伤组织,然后通过调整植物激素比例,再分化形成芽和根,获得大量试管苗(或通过诱导大量形成胚状体,制成人工种子,适宜条件下萌发长成幼苗) (2)茎尖(分生组织)组织培养 茎尖不带病毒(或病毒在植物体内分布不均匀) 植物细胞全能性 (3)①BBTV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术); ②BBTV病毒蛋白的检测(获得抗血清,利用抗原—抗体的杂交反应,判断病毒是否存在) (4)①选择NaCl溶液的合适浓度,利用DNA和其他杂质在不同NaCI溶液中溶解度不同的特性,达到分离目的;②加入一定量酒精,使部分蛋白质杂质溶解于酒精,与DNA分离; ③加入蛋白酶,除去蛋白质杂质的干扰;④控制DNA提取的温度,使大多数蛋白质杂质变性 (5)将afp基因插入土壤农杆菌的质粒,构建表达载体,通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞,成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。生态安全问题包括:①外源基因扩散到其他物种(外源基因漂移);②转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能;③转基因植株扩散对生物多样性的影响;④转基因植物残体或分泌物对环境的影响 (6)体细胞杂交育种,其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种(或体细胞诱变育种,其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变,然后筛选培育出抗寒品种) 蛋白质工程方法的步骤为:①果胶裂解酶蛋白的功能分析,②果胶裂解酶蛋白的结构预测和设计,③果胶裂解酶基因的改造 2.应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据下图回答下列问题: (1)在培育转入生长激素基因牛过程中,①过程需要的工具酶是______,②过程常用的方法是______________________ ______________________________。 (2)可通过转入生长激素基因牛分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有_____。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。 (3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体时,Ⅱ最可能是_______细胞,Ⅲ代表的细胞具有______的特点。 (4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,则与采用叶肉细胞相比较,其优点是______,⑤过程采用的技术是________。 (5)要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体水平上的鉴定过程:________________________________________________________________________。 (6)如果转基因植物的花粉中含有有毒蛋白或过敏蛋白,则将引起的安全性问题包括( ) ①生物安全 ②环境安全 ③食物安全 ④伦理道德问题 A.①②③ B.①② C.②③ D.①②③④ 【解析】 (1)①是目的基因与载体结合的过程,需要限制酶和DNA连接酶;②是重组质粒导入受体细胞的过程,常用的方法是显微注射法。(2)基因表达载体的首端必须有启动子;桑椹胚或囊胚阶段可以进行胚胎分割,这种方法可以培育出更多相同的转基因牛犊。(3)从图中看,Ⅱ最可能是浆细胞,Ⅲ是导入prG的重组细胞,具有无限增殖和产生特异性抗体的特点。 (4)愈伤组织细胞与叶肉细胞相比较,其优点是全能性高。 (6)花粉中若含有有毒蛋白或过敏蛋
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