免疫学检验--凝集反应.ppt

四、胶乳凝集试验 胶乳凝集试验也是间接凝集反应，因所用的载体颗粒为聚苯乙烯胶乳而得名。 胶乳凝集抑制试验检测HCG： 标本中加入相应量的HCG抗体，抗体与尿中HCG结合，再加入HCG胶乳抗原，本应凝集反应受到抑制，说明尿中含HCG，妊娠反应阳性。 第三节 抗球蛋白试验 抗球蛋白试验由Coombs于1945年建立，故又称为Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的经典方法。 Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接结合在红细胞表面抗原的不完全抗体，使红细胞凝集。常用试验方法有直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验。 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 * * 免疫学检验 第十三章 凝集反应 凝集反应概念、特点及类型。 直接凝集反应原理、方法类型及临床应用。 间接凝集反应原理、方法类型及临床应用。 抗球蛋白试验原理、方法类型及临床应用。 冷凝集试验的原理和临床应用。 本章要点 返回总目录 目　录 概述 1 第一节 直接凝集反应 2 第二节 间接凝集反应 3 第三节 抗球蛋白试验 4 第四节 冷凝集试验 5 小结 6 早在1896年，Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象，有效地诊断伤寒病。 至1903年，Landsteiner在特异性血凝现象的基础上发现了人类ABO血型，并于1930年获得了诺贝尔医学奖。 概述 一、概念 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 颗粒性抗原还包括可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒(O型人红细胞、绵羊红细胞、聚苯乙烯胶乳、炭粒等)结合成的致敏颗粒。 二、特点 1.抗原分子大，介质中成均匀的颗粒悬液。 2.抗原抗体复合物以抗原为主。 3.试验时稀释抗体。 4.效价报告抗体的稀释度。 三、主要技术类型 第一节 直接凝集反应 细菌、红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应（direct agglutination）。 凝集反应中的抗原称为凝集原（agglutinogen），抗体称为凝集素（agglutinin）。 常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。 一、玻片凝集试验 + 临床应用: 1.菌种鉴定 2.血清学分型 3.血型鉴定 方法评价: 1.操作简单、快速 2.敏感度低 3.定性检测 二、试管凝集试验 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 为半定量试验方法，在微生物学检验中常用已知菌液与一系列稀释的受检血清混合，保温后观察每管内抗原凝集程度，通常以产生明显凝集现象的最高稀释倍数作为血清中抗体的效价，亦称为滴度。 临床应用： 1.肥达试验Widal test 2.外斐氏试验Weil-felix test 3.交叉配血试验 方法评价： 1.半定量试验 2.操作简便、快速 3.敏感度不高 4.可有假阳性 第二节 间接凝集反应 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 一、载体 RBC 聚苯乙烯胶乳 载体的种类 离子交换树脂 活性炭 明胶颗粒 载体的条件： 1.不溶于水，理化性质稳定且无化学和免疫学活性。 2.大小均匀，密度与介质相近。 3.能直接吸附和通过偶联剂牢固结合抗原抗体。 二、方法类型 根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式不同，间接凝集反应可分为4类: 1.正向间接凝集试验 2.反向间接凝集试验 3.间接凝集抑制试验 4.协同凝集试验 三、间接血凝试验 抗原致敏红细胞 红细胞+抗原 抗原致敏红细胞凝集 抗体 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 人民卫生出版社 *