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Ion exchange chromatography 离子交换剂的结构组成 是一种含有多元酸或多元碱为功能基团的多孔网状立体结构的固相物 单元结构：多孔网状立体结构的骨架 不可移动部分 功能基团 可移动部分 离子交换剂的分类 无机物——沸石、磷酸钙凝胶 1)??骨架组成 疏水性骨架——树脂类 有机物 多糖类 亲水性骨架 有机聚合物 树脂类（苯乙烯类、酚醛类等） 多糖类（葡聚糖、琼脂糖、纤维素等） 有机聚合物（聚乙烯醇、聚丙烯酰胺等） 微孔型（凝胶型） 2)??骨架结构 大孔型 均孔型 酸性基团 —阳离子（强、弱） 3)??功能基团 碱性基团—阴离子（强、弱） 两性 ? 离子交换过程 离子交换： R—A+ + B+ = R—B+ + A+ 洗脱： R—B+ + C+ = R—C+ + B+ 再生： R—C+ + A+ = R—A+ + C+ 树脂类型 阴离子交换树脂: 含碱性活性基团的树脂 两性树脂 热再生树脂 脱盐20-25℃ 再生70-80℃ RCOOH+RNR2+NaCl=RCOONa+ RNR2HCl 螯合树脂：含有特殊的螯合活性基团 蛋白质通常以离子键吸附，因此要洗脱蛋白质时，必须提高盐浓度以破坏之，大多使用 NaCl； 蛋白质吸附在担体上的强弱程度，会影响洗脱所需使用的盐浓度，结合越紧的分子，要使用越高的盐浓度。 也可以改变洗脱缓冲液的 pH，使得蛋白质的电荷改变而洗脱出来，一般多使用前者。 所使用缓冲液的 pH 不要离目标蛋白质的 pI 太远，否则目标蛋白质带了太强的净电荷，会很强地吸附在离子交换介质上，就必须使用较为剧烈的洗脱条件，可能对蛋白质有所伤害。 阳离子交换分离（0.1mol·L-1 HCl为淋洗液） 离子交换树脂的命名 微孔（普通）型离子交换树脂 ABC×M? 大孔离子交换树脂 DABC 其中：A——分类代号 B——骨架代号 C——产品顺序号 M——交联度 国内外离子交换树脂相应牌号对照 724 = 101×4 弱酸 717 = 201×7 强碱 732 = 001×7 强酸 711 = 201×4 HD42 = 001 Amberlite IR系列 Zerolit 系列 神胶系列 离子交换树脂的制备 一般制备过程 骨架的合成：加聚法 或 缩聚法 + 交联 功能基团的引入：化学反应偶联引入功能基团；单体本身含有功能基团 离子交换树脂的性能 影响因素 功能基团的数目、种类 交联度 骨架、平衡离子 湿真密度 R=树脂湿重/排出同体积水重 功能基团↑，↑ 湿视比重=树脂湿重/外观容积 0.6-0.85g/ml 交换容量 是表征交换剂离子交换能力的主要参数。 (exchange capacity) mmol/g干树脂；mmol/ml湿树脂 与功能基团、pH有关 交换容量的测定 对于阳离子交换剂：用HCl将其处理成氢型，称重并测定其含水量；称数克交换剂，加入到过量已知浓度的NaOH溶液，发生交换反应，待反应达到平衡后(强酸性的需要静置24h，弱酸性的需静置数日)，测定剩余的NaOH摩尔数，就可求得阳离