基因的转录和调节.pptVIP

锌指的结构 ③碱性亮氨酸拉链，basic leucine zipper，bZIP，该结构的特点是蛋白质分子的肽链上每隔6个氨基酸就有一个亮氨酸残基，结果导致这些亮氨酸残基都在a螺旋的同一个方向出现。两个相同结构的两排亮氨酸残基就能以疏水键结合成二聚体，该二聚体的另一端的肽段富含碱性氨基酸残基，借其正电荷与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合。若不形成二聚体则对DNA的亲和结合力明显降低。 基因的转录过程 (三)原核生物的转录终止有两种不同方式 当核心酶沿模板3’一5’方向移行至DNA链的终止部位时，识别模板上特殊结构后便停顿下来不再移动，同时转录产物RNA链从转录复合物上释放出来，即转录终止。原核细胞和真核细胞转录终止机制和方式并不相同，这里主要探讨原核生物的转录终止。原核生物的转录终止分为 两大类，依赖ρ因子, Rho factor的转录终止和不依赖ρ因子的转录终止。 1．依赖ρ因子的转录终止 ρ因子是由6个相同亚基组成的六聚体蛋白，它具有两大生物活性：①解螺旋酶活性；②依赖RNA的ATP酶活性。 一般认为， ρ因子能对含有Poly C的RNA有较强的亲和力，转录终止阶段新合成RNA链出现富集的Poly C序列， ρ因子与其结合后能向RNA聚合酶方向移动，移动需要的能量来自于ATP酶水解ATP提供。p因子接触RNA聚合酶后，二者的构象发生改变，并利用其解螺旋酶活性拆离DNA-RNA杂化双链, 从而使转录产物从转录复合物中完全释放出来，转录终止。 ρ因子参与转录终止过程 2．非依赖ρ因子的转录终止 此种转录终止不需要蛋白因子参与，而是利用新合成的RNA链自身的某些特殊结构来终止转录。在DNA模板链接近转录终止的区域内有较密集的A T配对区和自身互补序列，这样使转录产物RNA的3’端常有若干个连续的U序列和自身互补序列形成的茎环，stemloop结构或发夹结构，hairpin structure。这两种结构是阻止转录继续进行的关键，其原因可能在于，发夹结构形成可能改变了RNA聚合酶构象，导致了酶-模板结合方式的改变，RNA聚合酶则不再向下移动，同时连续的U序列也能促进RNA聚合酶从模板上脱落下来。 RNA的发夹结构与转录终止 真核细胞转录终止方式与原核细胞不同，而是与转录后的修饰密切相关。目前发现，在模板链读码框架的3’端之后，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列，这些序列称为转录终止的修饰点。当转录越过修饰点后，mRNA在修饰点处被切断，随即加入polyA尾巴和5′帽子结构，并被释放出来。越过修饰点后RNA虽然能继续转录，但很快被降解。 三、初级转录产物需经过转录后加工才具有活性 绝大多数原核生物转录和翻译是同步进行的，在转录生成mRNA的同时，核蛋白体即附着在mRNA上并以其为模板进行蛋白质的合成，因此原核细胞的RNA并无特殊的转录后加工过程。真核生物转录和翻译在时间和空间上是分开的，刚转录出来的RNA是分子很大的前体，需经转录后的加工过程才能转变成成熟的RNA。 (一)hnRNA进行首尾修饰和内含子剪接后转变为成熟的mRNA 真核细胞mRNA前体称为不均一核RNA，hnRNA，它在细胞核内合成，必需经过一系列加工修饰过程才能转变为成熟mRNA，主要加工修饰包括以下几个方面 1．5-末端加上“帽子”结构 在鸟苷酸转移酶催化下，在真核生物hnRNA的5-末端加上一分子鸟苷酸残基。然后对该残基进行甲基化修饰，使其成为7甲基鸟苷酸，该结构称为“帽子”。其功能是 ①增加mRNA稳定性，保护mRNA免遭5′-核酸外切酶的攻击而被降解。②与蛋白质生物合成起始有关。它是mRNA作为翻译起始的必要的结构，可以帮助核蛋白体识别翻译起始部位。原核生物mRNA没有“帽子”结构。 2．在3-末端加上尾结构 大多数真核mRNA都有3’端多聚A尾巴，多聚A尾巴大约为200bp，它不是由DNA编码的，而是转录后在核内加上去的。在多聚腺苷酸聚合酶的催化下，以ATP为底物，在hnRNA的3’末端加上一段多聚腺苷酸，Poly A，该结构称为“尾”。目前认为，polyA尾巴可能与mRNA从细胞核转送到细胞质有关。还有人认为这种结构对真核mRNA的翻译效率具有某种作用，并能稳定mRNA结构，保持一定的生物半衰期。 卵清蛋白基因转录及加工过程 3．hnRNA链的剪接 真核生物基因往往是断裂基因，即编码一个蛋白质分子的核苷酸序列被多个插人片断，内含子，intron所隔开。在转录时，外显子及内含子均转录到hnRNA中，但在细胞核中hnRNA首先在核酸内切酶，endonuclease作用下剪切掉内含子，然后在连接酶，1igase作用下，将外显子，extron