第3章核酸的结构与功能精选.pptVIP

体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 二、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 DNA双螺旋结构的研究背景 20世纪20年代，大多数科学家认为蛋白质是遗传物质，而不是DNA 三、DNA的功能 tRNA是细胞内分子量最小的RNA（占总RNA的15％） 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线。 第 六 节 核 酸 酶 Nuclease 核酶的发现 Before the discovery of ribozymes, only proteins were known to have catalytic activity. In 1967, Carl Woese, Francis Crick, and Leslie Orgel were the first to suggest that RNA could act as a catalyst based upon findings that it can form complex secondary structures. 核酶的发现 The first ribozyme was discovered in the 1980s by Thomas R. Cech , who was studying RNA splicing in the ciliated protozoan Tetrahymena thermophila. This ribozyme was found in the intron of a RNA transcript and removed itself from the transcript. 核酶（ribozyme) (2) 1992年，Piccirilli等发现L19RNA具有氨酰酯酶的活性，催化氨酰酯水解。 (3) L19RNA还有限制性内切酶作用： -CpUpCpUpN- + G -CpUpCpU +GpN (4) 1997年，Zhang和Cech用人造的RNA分子催化合成了肽链，表明RNA具有肽基转移酶活性。 (5) 原核生物RNaseP和 兔肌1，4- ?-葡聚糖分枝酶 RNA既能携带遗传信息 又有生物催化功能。 ——RNA可能早于蛋白质和DNA， 是生命起源中首先出现的生物大分子 切割癌基因、致病病毒基因 三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation) 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 在DNA复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) DNA-DNA 杂交双链分子 不同来源的DNA分子 核酸分子杂交的应用 1.研究DNA分子中某一种基因的位置 2.鉴定两种核酸分子间的序列相似性 3.检测某些专一序列存在与否 4.是基因芯片技术的基础 核酸酶 是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase) RNA酶 (ribonuclease, RNase) 依据切割部位不同 核酸内切酶 核酸外切酶 参与DNA的合成、修复及RNA剪接等 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸 降解食物中的核酸以利吸收 体外重组DNA技术中的重要工具酶 核酸酶的功能 核 酶 催化性DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。 催化性RNA (ribozyme) 作为序列特异性的核酸内切酶降解mRNA。 （一）核酶：具有催化活性的RNA (1) 1982年，Cech首先发现四膜虫 L19RNA既有RNA酶活性，又有 RNA聚合酶活性。 随后的研究表明： L19RNA具备酶促催化的几个特征： 高度的底物专一性 遵循Michaelis-Menten动力学 对竞争性抑制剂的