高级生物化学考试题.docVIP

高级生化复习重点及时间安排 一、生化复习中常见名词总结： peptide unit motif protein denature protein quaternary structure 结构域 蛋白质等电点 α- 螺旋 蛋白质三级结构 肽键 核小体 碱基互补 核糖体 核酶 核酸分子杂交 RNAi：在多种生物细胞中，外源或内源性双链RNA(dsRNA)可触发细胞内同源mRNA的特异性降解，从而使该基因表达沉默，这种现象称为RNA干扰（RNAi）。 restriction endonuclease vector DNA cloning 同源重组 cDNA 文库 基因组 DNA 文库 蛋白质印迹技术 探针（ probe ） 人类基因组计划 后基因组研究 gene knock out 限制性片段长度多态性分析（ RFLP ） DNA 芯片 基本的（组成性）基因表达 操纵子 增强子 管家基因 Promoter 二、生化复习中常见问答题总结： 1．蛋白质的基本组成单位是什么？其结构特征是什么？ 答：实验证明氨基酸是蛋白质的基本组成单位。氨基酸的一般结构特征的氨基酸很多，但组成蛋白质分子的氨基酸只有20种左右这20种氨基酸中，除脯氨酸外（是一种亚氨基酸），均为α-氨基酸。各种蛋白质所含的氨基酸的数目和种类都各不相同。　　α-氨基酸的结构，可用下式表示。式中Ｒ为α-氨基酸的侧链，方框内的基团为各种氨基酸的共同结构。 　　从结构通式可以看出，除Ｒ为氢原子（即甘氨酸）外，所有α-氨基酸分子中的α-碳原子都为不对称碳原子。因此，第一，氨基酸都具有旋光性，能使偏振光平面向左或向右旋转，左旋者通常用（-）表示，右旋者用（+）表示；第二，每一种氨基酸都有Ｄ-型和Ｌ-型两种立体异构体，这取决于α-碳原子上氨基的位置。书写时将羧基写在α-碳原子的上端，则氨基在左边的为Ｌ-型，氨基在右边的是Ｄ-型，这是与甘油醛的构型相比较后确定的。 　　氨基酸的构型与旋光方向无直接对应的关系。从蛋白质水解得到的α-氨基酸（除甘氨酸外）都属于Ｌ-型的，所以习惯上书写氨基酸都不标明构型和旋光方向。虽然蛋白质组成成分中没有Ｄ-型氨基酸，但在生物界存在着Ｄ-型氨基酸，如某些细菌产生的抗生素就含有Ｄ-型氨基酸。 12．简述基因表达调控的意义。 13．简述原核基因表达调控的特点。 14．简述真核基因转录因子分类及功能。 15．遗传信息是如何从DNA传递到蛋白质的。 16．简述基因位点特异的重组和同源重组的差别。 17．何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程。 18．请简述基因工程的基本操作步骤。 19．简述PCR的基本反应步骤。 20．什么是癌基因，癌基因活化的机制？ 答：存在于生物正常细胞基因组中的癌基因称为原癌基因或细胞癌基因。在正常情况下这些基因处于静止或低表达的状态，不仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具有重要作用；当其受到致癌因素作用被活化并发生异常时，则可导致细胞癌变。 （4）核内转录因子：已知某些癌基因表达蛋白（如myc、fos等）定位于细胞核内，它们能与靶基因的调控元件结合直接调节转录活性起转录因子作用。这些蛋白通常在细胞受到生长因子刺激时迅速表达，促进细胞的生长与分裂过程。目前普遍认为，c-fos是一种即刻早期反应（立早）基因（immediate-early gene，IEG）。在生长因子、佛波酯、神经递质等作用下，c-fos能即刻、短暂表达，作为传递信息的第三信使。 22．什么是抑癌基因?举例说明抑癌基因的作用机制。 答：抑癌基因是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。对于正常细胞，调控生长的基因（如原癌基因等）和调控抑制生长的基因（如抑癌基因等）的协调表达是调节控制细胞生长的重要分子机制之一。这两类基因相互制约，维持正负调节信号的相对稳定。当细胞生长到一定程度时，会自动产生反馈抑制，这时抑制性基因高表达，调控生长的基因则不表达或低表达。前已述及，癌基因激活与过量表达与肿瘤的形成有关。同时，抑癌基因的丢失或失活也可能导致肿瘤发生。 例如人类P53基因：野生到P53蛋白在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要作用，因而被冠以基因卫士称号。P53基因时刻监控着基因的完整性，一旦细胞DNA遭到损害，P53蛋白与基因的 DNA相应部位结合，起特殊转录因子作用，活化 P21基因转录，使细胞停滞于G1期；抑制解链酶活性；并与复制因子A（replication factor A）相互作用参与DNA的复制与修复；如果修复失败，p53蛋白即启动程序性死亡过程诱导细胞自杀，阻止有癌变倾向突变细胞的生成，从而防止细胞恶变。?????当P53发生突变后，由