第七章-发酵染菌与防治讲解.ppt

1 2 防止发酵生产中杂菌污染有着重要的意义：1、保证发酵产品的质量、收率的温度2、保持发酵生产正常有序的进行3、有利于节约型社会的建立 一、发酵异常现象及染菌分析 （一）种子培养基和发酵的异常现象 1、种子培养基异常 出现菌体生长缓慢的原因是：1、种子自身的原因，菌种使用时间过 长，传代频繁、菌体老化及接种量少2、培养基的原因：批次间原料成分波动大。种子培养基营养缺乏3、操作过程中的原因，培养基灭菌不彻底、供氧不足等原因 出现菌丝结团的原因是：通气不足、溶氧条件差、搅拌的剪切力力过大、培养基质量下降等原因 出现代谢不正常的原因是：培养环境差、接种量少、杂菌污染等原因 2、发酵异常 1、菌体生长差2、PH异常3、溶解氧水平异常4、泡沫过多5、菌体浓度过高或过低 （二）染菌隐患检查 发酵过程是否染菌应以无菌试验的结果为依据。无菌试验方法主要有：显微镜检查法、肉汤培养法、平板培养法、发酵过程中的异常观察法。 （三）发酵染菌原因 总结为发酵工艺流程中的各环节漏洞和发酵过程中管理不善两方面。 各环节漏洞包括：1、培养基灭菌不彻底2、无菌空气带菌3、种子带菌4、消泡剂带菌5、工艺用水带菌6、管道及附属设备或罐体出现渗漏或死角7、泡沫逃溢8、批次发酵后清洗不彻底等 发酵过程中管理不善：1、工人的培训不到位导致操作上的认识2、发酵车间卫生环境差3、设备未定期检修4、管理制度不完善 （四）染菌原因分析 1、染菌杂菌分析表7-5 2、发酵染菌的规模分析 大批量发酵罐染菌： 染菌时期 原因 发酵前期 种子带菌、连消设备染菌 发酵中后期 一般空气净化系统结构不合理、空气过滤介质失效等 染菌时期 原因 发酵前期 种子带菌、联销系统灭菌不彻底 发酵后期 中间补料染菌，如补料液带菌、补料管渗漏 个别发酵染菌：大都是由于设备渗漏造成，应仔细检查阀门、罐体、管路是否清洁。 3、不同污染阶段分析：1、染菌发生在种子培养阶段，或称种子培养期染菌2、在发酵过程中的初始阶段发生染菌，或称发酵前期染菌3、发酵后期染菌大部分由空气过滤不彻底，中间补料染菌，设备渗漏、泡沫顶盖以及操作问题引起。 （五）染菌隐患处理 在正式发酵之前必须做到以下几点：1、严格按照生产工艺要求的各项指标、参数、条件进行操作2、投产前进行整个发酵系统的无菌测试3、严格工人的管理，实行操作记录制度4、加强在线加测的技术手段，各种生物传感器、探头要定期校正5、定期对设备进行检修 二、染菌对发酵的影响 （一）染菌对不同发酵过程的影响 （二）杂菌的种类和性质对发酵过程的影响 （三）染菌发生的时间不同对发酵的影响：1、种子培养期染菌2、发酵前期染菌3、发酵中期染菌4、发酵后期染菌 （四）染菌程度对发酵的影响：染菌程度越大，发酵罐内的杂菌量越多，对发酵的危害也就越大，如果染菌严重尤其是发酵的前期、中期，对发酵的影响是非常严重的。 三、染菌污染后的挽救和处理 （一）种子培养期染菌的处理：若发现种子罐被杂菌污染，应立即停止向发酵罐内在输送种子，进行灭菌后排放，然后对种子罐连接的物料管道、供气管道进行彻底的灭菌，与此同时，采用未受污染的正常种子接入发酵罐中，以保证生产的连续性，如无备用的种子，则可以选择一个适当菌领的发酵罐中的发酵液作为种子，接入新鲜的培养基中进行发酵，从而保证生产的正常进行。 （二）发酵前期染菌处理：1、发酵前期发生染菌后，如培养基中的碳、氮源含量还比较高时，终止发酵，将培养基加热至规定温度，重新进行灭菌处理后，再接入种子进行发酵2、如果此时染菌已造成较大的危害，培养基中的碳、氮源的消耗量已比较多，则可以放掉部分料液，补充新鲜的培养基，重新进行灭菌处理后，再接种进行发酵3、也可采取降温培养、调节PH、调整补料量、补加培养基等措施进行处理 （三）发酵中后期染菌处理1、发酵中、后期染菌或发酵前期轻微染菌而发现较晚时，可以适当加入杀菌剂或抗生素以及正常的发酵液，以抑制杂菌的生长速度，也可采取降低培养温度、降低风量、停止搅拌、少量补糖等措施，进行处理2、如果发酵过程的产物代谢已到达一定水平，此时产品的含量若达一定值，只要明确是染菌也可放罐3、对没有提取价值的发酵液，加热后排放 （四）染菌后对设备的处理：必须放罐后进行彻底清洗，空罐加热灭菌至120℃以上、保持30min才能使用 四、污染的防治策略 （一）强化空气处理过程：1、空气净化流程2、过滤介质选择3、过滤介质的填装4、空气净化系统的管理 （二）严格培养原料及设备的灭菌 1、原料预处理 原料除杂目的：为了清除谷物或水果原料中的土块、石块、掉落的铁质零件，以免使机械收到磨损，发生故障。影响后面的发酵工序 粉碎的目的：为了增大原料的比表面积，减少固体的团块 浸泡的目的：为了使原料与水充分接触，进而使营养物质便于菌体的利用 2、培养基的灭菌