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细胞培养技术 目录定义 在现代医学和生物科学研究中应用广泛 优点 缺点 细胞类型 细胞生长与增殖 细胞生命期(life span of culture cells) 培养细胞一代生存期 定义 在现代医学和生物科学研究中应用广泛 优点 缺点 细胞类型 细胞生长与增殖 细胞生命期(life span of culture cells) 培养细胞一代生存期 展开 　　指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中细胞不再形成组织（动物）。 编辑本段定义 　　培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中，由于环境的改变，细胞的移动或受一些其他因素的影响，培养时间加长，传代导致细胞出现单一化型。 编辑本段在现代医学和生物科学研究中应用广泛 优点 　　1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学 等多种学科研究. 　　2.直接观察细胞的变化可便于摄影。 　　3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。 　　4.便于使用各种技术：相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。 　　5.是分子生物学和基因工程学的研究对象，也是其主要的组成部分。 　　6.易于施用物理、化学生物的实验研究。 　　7.易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。 　　8.成为生物制品单克隆抗体生产和基因工程等的材料来源。 缺点 　　组织和细胞离体后独立生存在人工的培养环境中，虽然模拟体内环境，仍有很大差异。 因而利用培养细胞做实验时，不应视为体内细胞完全相同，把实验结果推测体内，轻易做出与体内等同的结论。 细胞类型 　　细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性，分为: 贴附型 悬浮型 　　（一）贴附型 　　细胞贴附在支持物表面生长，只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。 　　贴附型细胞的分型 　　1.成纤维型细胞：(fibroblast) 来自中胚层 　　特点：与体内成纤维细胞形态相似,胞体梭型或不规则三角形,中央有圆形核,胞质向外伸出2～3个长短不同的突起。细胞在生长时呈放射状,漩涡或火焰状走行。 　　起源：细胞来自中胚层间充质组织。 　　除真正的成纤维细胞、心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮细胞。 　　注意：细胞在培养时成为成纤维型细胞是一种惯称,与体内细胞不同。 　　2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层 特点：扁平不规则多角型、圆形核、细胞紧密相连成细胞增殖数目增多时,整个上皮膜随之移动。边缘细胞很少脱离细胞群而单独活动“ 拉网”现象与起源内外胚层组织有关。 　　组织: 皮肤表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。 　　3. 游走型细胞(wandering cell type) 　　特点：在支持物上散在生长,不连接成片,胞质伸出伪足或突起呈活跃的游走或变形运动,速度快不规则, 密度大连接成片呈多角形不易与其他类型的细胞 区别。 　　4. 多形型细胞 (polymorphic cell type) 　　特点： 无规律的形态，如神经细胞。 　　悬浮型细胞(suspended cell type) 　　特点： 不贴附在支持物生长，胞体圆形，在培养液中生长空间大，可长时间的生长，繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL－60。 　　分型的目的： 　　方便描述细胞在培养过程中的形态变化。培养条件好时，细胞相对稳定，可反映出起源、正常异常的区别，作为判定细胞生物学性状指标。 　　强调：一般形态并不是一项可靠指标要受各方面影响。 　　如：反复开关温箱、温度、C02的浓度、培养基变碱、支原体、pH值。细胞在接种时呈三角型状态，经培养一定时间后，细胞在传代前已形成上皮型细胞。 编辑本段细胞生长与增殖 　　培养细胞的生存环境是培养瓶、器皿或其他容器，生存空间及营养是有限的。当细胞增殖到一定密度后，分离出一部分细胞和更新营养液，使细胞更好地生存，这一过程称之为“ 传代”(passage或subculture)。 值得注意的是：每次传代细胞在生长和增殖方面受到一定的影响 细胞生命期(life span of culture cells) 　　指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。 　　如：二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下可传30～50代，相当于150～300个细胞增殖周期，能维持一年左右的生命，细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段 　　1.原