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超薄切片技术 河北大学细胞生物学 由于电镜电子束穿透能力的限制，必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用，这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。 在透射电镜的样品制备方法中，超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似，需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步骤。  超薄切片主要步骤 取材、分割 固定 脱水 渗透、包埋 超薄切片 超薄切片染色 1 取材、分割 1.1 取材、分割的基本要求 ? ? 组织从生物活体取下以后，如果不立即进行适当处理，会由于细胞内部各种酶的作用，出现细胞自溶现象。此外，还可能由于污染，微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏。因此，为了使细胞结构尽可能保持生前状态，必须做到快、小、准、冷。 (1)动作迅速，组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液。(2)体积要小，一般不超过0.5mm×0.5mm×0.5mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。因为固定剂的渗透能力较弱，组织块如果太大，块的内部将不能得到良好的固定。 (3)机械损伤要小，解剖器械应锋利，操作宜轻，避免牵拉、挫伤与挤压。 (4)操作最好在低温(0℃～4℃)下进行，以降低酶的活性，防止细胞自溶。 (5)取材部位要准确。 ? 1.2 取