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药学微生物项目四培养基的配制2讲解
* 培养基配制 一、营养六要素 碳源:提供微生物繁殖所需碳元素的营养物质。用途:糖、蛋白质、核酸合成。 A 异养微生物:必须利用有机碳源 C 自养微生物:能利用无机碳源 0 氮源 提供微生物繁殖所需氮元素的营养物质。用途:蛋白质、核酸合成。 能源 提供微生物生命活动最初能量来源的营养物或辐射能(光能自养或者光能异养微生物的能源)。 生长素(因子) 微生物生长必需,但又不能自行合成的有机物。主要为氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶等。 无机盐 提供微生物繁殖所需各种重要矿质元素。 水分 水是保证生命活动重要的介质。 二、培养基的种类 按营养物质来源分类: 1. 合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。(如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。) 2. 半合成培养基:有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。(如马铃薯蔗糖培养基。) 3. 天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成。 (如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。) 从培养基的物理状态可分为 1. 液体培养基: 不加凝固剂(常用凝固剂为琼脂)的液体状态培养基。 2. 固体培养基 在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基或农副产品培养基。 3. 半固体培养基 在液体培养基中加入0.2-0.5%凝固剂而成的半 固体状培养基。 按培养基用途分类 加富培养基:加富培养基是指在普通培养基里加过血、血清、动物(或植物)组织液或其他营养物质(或生长因子)的一类营养丰富的培养基,用以培养某种或某类营养要求苛刻的异养微生物 选择培养基:选择培养基是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可以将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。 鉴别培养基:普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征性变化,以区别不同的微生物 三、培养方法 厌氧培养法 生物学方法:利用新鲜组织呼吸作用消耗氧气(如凡士林)。 化学方法:加入强还原性物质 物理方法:抽气、换气 需氧培养法 振荡培养;将斜面、培养基直接放入有氧气的地方。 CO2分离法 常用于脑膜炎球菌;可采用点燃蜡烛或通过化学反应生成。 微需氧培养法 厌氧培养箱控制氧压。 四、营养肉汤琼脂培养基的配制 1.配方 牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、水、氢氧化钠、盐酸; 牛肉膏:含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类,在培养基中主要作用是补充蛋白胨以及其它氮源的营养不足。 琼脂:多糖体;常做凝固剂、增稠剂。 2.高压蒸汽灭菌锅的使用 灭菌原理 在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种杂菌。 *
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