第11章酶的催化作用和酶的调节.pptVIP

第11章酶的催化作用和酶的调节 酶的活性部位 酶催化反应的独特性质 影响酶催化的有关因素 酶催化反应机制的实例 酶活性的调节机制 同工酶 2、酶活性部位的共同点： （1）酶活性部位仅占酶体积的很小一部分，通常只占整个酶分子体积的1~2%。 （2）酶的活性部位具有三维结构。 （3）活性中心的结合基团与底物专一性结合，酶与底物结合具有两种情况：直接嵌合和诱导嵌合。 （4）酶活性部位位于酶分子表面的一个裂缝内，底物分子或底物分子的一部分结合到裂缝中，裂缝内的非极性基团较多，形成一个疏水环境，提高与底物的结合能力，也有极性的氨基酸残基，以便与底物结合并催化底物发生反应。 （5）底物通过较弱的次级键与酶结合。 2、酶活性部位的测定方法 （1）共价修饰 （2）亲和标记法 （3）切除法 （4）X 晶体结构分析法 二、酶促反应机制 （一）基元催化的分子机制：酶的催化作用包括若干基元催化。基元催化是由某些基团或小分子催化的反应，这些小分子催化剂或催化基团不是亲电催化剂，就是亲核催化剂，包括酸碱催化、共价催化、金属离子催化等。 （二）酶具有高催化能力的原因 ★酶与底物结合成ES复合物后，能降低反应的活化能，实现高效率催化机制与下列因素有关： 1、底物与酶的邻近效应与定向效应 2、底物分子的敏感键发生形变和诱导契合 3、电荷极化和多元催化 4、疏水的微环境的影响 （三）协同性配体结合的模型 1、齐变模型（协同模型、对称模型或WMC模型）要点 ①别构酶分子中的亚基以旋转对称方式排列；每个亚基对每种配体（底物或调节物）只有一个结合位点。整个酶分子以两种构象存在，分别是松弛型（R型）和紧密型(T型)，R 型有利于与底物或调节物结合，T型不利于与底物或调节物结合 ②同一酶分子中，不存在构象杂合体（RT型），它的亚基要么都以R型存在，要么都以T型存在。 ③两种构象状态间的转变，对每个亚基来说，都是同时、齐步发生的。 ④当底物不存在时，绝大多数酶分子均为T型，加入底物后，T型各亚基齐步向R型转变，且对称性保持不变。转变为R型后加大了对底物的亲和性 （2）序变模型（或渐变模型或KNF模型） ①别构酶的亚基只有两种构象状态，R型和T型，其中R型为“开”的构象，有利于与底物或调节物结合，T型为“关”的构象，不利于与底物或调节物结合。 ②当底物或调节物不存在时，别构酶只以一种构象存在，即T构象 ③当底物与一个亚基结合时，此亚基构象发生变化，并使邻近的亚基易于发生同样的构象变化，当第二个底物与第二个亚基结合后，又导致第三个亚基易于发生同样的变化，如此顺序传递下去，直到最后一个亚基发生类似的够象变化。即同一酶分子中，各亚基从T向R转变是逐个依次进行的。 ④一个亚基与底物结合引起的构象变化，会增强或减弱同一酶分子中其余亚基对底物的亲和力，即可为正协同效应也可为负协同效应。 * 一、酶的活性部位及测定方法 （一）酶活性部位概念及特点 1、酶的活性中心概念：指酶分子中的表面有一个必需基团比较集中、并构成一定空间结构的微小区域。酶活性中心的基团,按其功能可分为结合基团和催化基团。 必需基团 活性部位以外的必需基团：维持酶的空间结构 活性部位必需基团 结合基团 催化基团 专一性 催化性质 别构调节酶（配体调节酶或变构酶） 活性部位 调节部位 别构物（或叫效应物） 正效应物或别构激活剂 负效应物或别构抑制剂 同促别构效应 正协同同促效应（或正同促作用） 负协同同促效应（负同促作用） 三 、酶活性的别构调节 （一）酶的别构效应 (二) 别构酶的动力学特点 1、已知的别构酶都是寡聚酶，别构酶具有活性中心和别构中心。 2、别构酶的动力学曲线： 对于正协同同促酶，v对[S]作图，是“S”形曲线。 对于负协同同促酶，v对[S]作图，类似于米氏双曲线，但又不完全相同，我们叫“表观双曲线”。 3、对于异促别构酶，将异促别构酶和异促效应物可分为K系统和V系统寻找共性 4、别构酶是寡聚酶，如果通过加热或用化学试剂等处理，引起别构解离，叫脱敏作用。 目前常用齐变模型和序变模型解释别构酶的调节机制。 [S] v 非别构酶 正协同 负协同 加激活剂 加抑制剂 不加 K系统别构酶 加抑制剂 加激活剂 不加 V系统别构酶