环介导等温扩增法快速检测手足口病病原体.docVIP

环介导等温扩增法快速检测手足口病病原体 　　【摘要】 目的：建立逆转录（RT）-环介导等温扩增方法（LAMP），以快速检测手足口病最重要的两种病原体：肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）。方法：收集手足口病患儿咽拭子标本93份，针对EV71和CA16病毒的VP1基因特异性序列8个区域各设计6条LAMP引物，分别于63 ℃（EV71）、65 ℃（CA16A）扩增1 h，日光下观察结果，与实时荧光定量PCR比较检测特异性和敏感性。结果：EV71、CA16的LAMP最低检测限均为500拷贝/管，与对照病毒无交叉反应。93份标本中，RT-PCR方法检测显示EV71阳性44例，CA16阳性36例；RT-LAMP方法检测显示EV71阳性46例，CA16阳性36例，两种方法间比较差异均无统计学意义（P0.05）。结论：应用RT-LAMP检测手足口病病原体EV71、CA16快速、灵敏、经济、特异性高，适合在基层医疗机构推广应用。 　　【关键词】 逆转录-环介导等温扩增技术； 肠道病毒71型； 柯萨奇病毒A组16型； 手足口病 　　【Abstract】 Objective：To rapidly detect pathogens of hand-foot-and-mouth disease （HFMD） by reverse transcription loop-