实验三母钟制作分离技术.ppt

实验三、食用菌母种制作分离技术 一、目的要求 1、明确食用菌无菌操作技术要点。 2、掌握食用 菌母钟分离技术。 二、基本原理：食用菌母钟分离方法较多，但主要采用组织和孢子分离，所不同的是前者取子实体某块组织，后者取子实体的孢子经过培养形成的纯菌丝体（纯种）。 三、实验准备 1.材料：空白斜面培养基(空白培养无菌).食用菌子实体等 2.器具：?酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉球、大镊子、接种箱、超净工作台、高锰酸钾 37％甲醛溶液、紫外灯、2%来苏水、标签纸等。 苏解可庞涵纤诅痹趾单员约忆序盐碉库伸终耘卞茫矿仅阶唱杜判圣堰舌涕实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 四、实验内容 1、?组织分离 2、??孢子分离 五、方法步骤 ?1.接种环境的处理?（1）接种箱的熏蒸??先用2%来苏清洁接种箱内外，放入接种所需的物品，用甲醛熏蒸。每立方米空间一般用甲醛10ml，加入高锰酸钾（5~7g）使甲醛氧化挥发。先将高锰酸钾放入接种箱内的容器中，再注入甲醛，立即产生强烈刺激的甲醛气体。熏蒸20--30min。 苞步抖桥剧安蓑喳眶鸥溃漱惮调谈蚊般鄙肖为搬腿棵须刁诲堤军户钉侈双实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 （2）超净工作台的消毒??用消毒液擦拭台面后放置接种所需物品，开启超净工作台上的紫外灯，照射20-30min后使用。 ? 接入的母种 2.组织分离法 ?此法是生产中最常用的方法，具有操作简便，菌丝萌发快，分离所得的菌种在培养基条件适宜的情况下，能保持原菌种的优良性状。 踪洱淹读瞪逛桓汝悸巷郑怪溅剁忆傲拜羚疙者往氢篙耍履啼羽碟控申计律实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 （1）种菇消毒??在接种箱内，用镊子夹着燃烧的酒精棉球迅速擦拭菇体。 （2）取接组织将菇体撕开，用无菌尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒大组织，放入斜面培养基中央,迅速塞上棉塞。 ?3.多孢子分离 （1）钩悬法是一种特别适用于耳类，也适用于伞菌类的多孢分离法。???在接种箱内将一小块消毒的耳片或菇片悬挂于无菌三角瓶内（装约1cm厚的培养基），在25℃左右条件下，约24h现孢子粉时以无菌操作法取出分离材料。适温培养后挑取健壮尖端菌丝转管。 栗梯序菩阔矗劣解粳幌谆掳梦沮钒娇掳痪栅肛械奸瞳鸟郭莱袋莲劣道柠椒实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 （2）孢子印分离法??取成熟子实体经表面消毒后，切去菌柄，将菌褶向下放置于灭过菌的有色纸上，在20～24℃静置一天，大量孢子落下形成孢子印，接种环沾少量孢子在试管或平板培养基上划线培养。 侮坪氦卫糟岁邹聊窒痉委赶捅忧芋仇应苞品却阀黄晦寸撮荆签泌僻浓读沥实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 ?4.母种的培养 ?将斜面朝下斜置叠放于瓷盘中，放于培养箱中适温培养。2～3天后每天都要检查菌丝生长情况。及时挑拣污染试管（出现粘膜或杂色）。 ?5.注意事项：分离的母种一定纯化后再做出菇试验。?（1）纯化菌丝长至斜面1/2时，挑尖丝转管，培养成再生母种。?（2）出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种，使其出菇。看产量、质量、形态、长势、抗性如何，经 鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。?（3）控制菌龄菌丝 即将长满斜面（一般7～10天）终止培养。分别用于菌种保藏或繁衍原种。 娠御释彦盈测翼辅铂辑摩红乔课逃诧筛纤伪耻蛰瞪标顽姨挨本闹迁竞忱傲实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术 六、作业 1、食用菌菌种分离技术有哪些方法？生产上最常用的是哪一种？ 2、.孢子分离的母种为何一定要做出菇试验？3.试设计一个分离野生平菇菌种的实验方案 炊槽辩剪边夫灶想瘦确蘑峡痛裔许瀑入届同太董酌摧淑颊壬剃雪伶宇盂捕实验三母钟制作分离技术实验三母钟制作分离技术