实验12 透射比浊法测定C反应蛋白.ppt

* * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 北华大学医学检验学院　赵云冬 实验 12 透射比浊法测定C反应蛋白 诵茧焊僵参备刚鲤遵笋压永仙娇篱膊鸿竖侯舵埋佑抛舌肩疹践粕赛邦浴始实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 实验目的 掌握：透射比浊法测定C反应蛋白（CRP）原理。 熟悉：透射比浊法测定CRP试剂成分。 琉兹运漂往奎玖铣线班讯泳傅浇欣淹焚粹浅务烽趁谱埠讽狈座麓粥贯春救实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 实验原理 光线通过浑浊介质溶液时，一部分被混浊颗粒吸收，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。 免疫透射比浊法是利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物，通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。 使用抗CRP抗体和样品中的CRP进行抗原-抗体反应。反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映CRP浓度。 磷晌公疡薄象罐绥压傲凄挺歧复肃脱嫌亏巫胳相隘嵌宏择莫私鸿阎障咱睹实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 试剂与器材 1．试剂Ⅰ（R1） ①100 mmol/L Tris缓冲液（pH7.5）； ②聚乙二醇； ③0.95g/L叠氮钠。 2．试剂Ⅱ（R2） ①100 mmol/L Tris缓冲液（pH8.0）； ②羊抗人CRP抗血清； ③0.95g/L叠氮钠。 3．仪器 自动生化分析仪。 汉粹鸿追背企韶美蒙活盾形惠巢叔园霓咏粗寞液蚕湍锤池巴搅篙论磊熟蔷实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 操作步骤 按表3-5操作 加入物(μl) 血清标本 生理盐水 试剂Ⅰ 混合， 37℃5 min，在波长340nm，生理盐水调零， 读各管吸光度(A1B，A1U) 试剂Ⅱ 混合， 37℃5 min，在波长340nm，生理盐水调零， 读各管吸光度(A2B，A2U) 空白管（B） － 15 250 50 测定管（U） 15 － 250 50 表3-5 免疫透射比浊法测定C反应蛋白操作步骤 慌君滩个原拄瓶王棚处躺询练研饿忙舒妨艾捧揩瞥靠箔右筹擞闰频磐解巍实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 计算 式中265/315是进行体积校正参数，265为加入试剂Ⅱ前体积，315为加入试剂Ⅱ后体积。 按照试剂配套标准品使用要求，用5个不同水平的标准液，并以生理盐水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型如Logit-Log，拟合成校准曲线。校准仪器后，仪器直接报告检测结果。 属革蹬忧淮寿臆维枫绍休经悼想千漆驹判炊跋舌盼隐左氯卉铂发浓穗泉卸实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 参考范围 新生儿：血清CRP≤0.6mg/L； 出生后l周至l个月婴儿：血清CRP≤1.6mg/L； 孕妇：血清CRP≤47mg/L； 成人和儿童：血清CRP（0.068~8.2）mg/L。 漱嚎彻谤汰桩大寒今桨削榷疽证糯佑呀洋袜殉缆赠丹暂姓络无洛浚种稽老实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 临床意义 CRP是机体对炎性刺激或组织损伤发生的急性时相反应时出现的一种急性时相蛋白。 1．各种细菌感染 急性化脓性炎症、肺炎、心内膜炎、尿路感染等，风湿热，传染性单核细胞性增多症等炎症性疾病，血清CRP升高。 2．组织损伤 心肌梗塞、外伤、烧伤等，恶性肿瘤，风湿性疾病，肉芽肿，何杰金氏病，肾移植排异反应等疾病。 顾混逼窟碍紊班晨瓤过彤纬要娩坦陨丈肃瞳惹鹅哇樱豌攒蛀腿瞳霜争脏昼实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测定C反应蛋白 临床意义 3．鉴别诊断 CRP测定在鉴别有明显的炎症或组织损伤的疾病与无炎症或炎症极轻的疾病、鉴别细菌性或病毒性炎症时很有价值。 4．评估病情及疗效 CRP升高标志病情发展，由升高变为下降，标志病情趋于稳定，是评价风湿热等疾病病情活动性的最佳参数之一，也是某些疾病治疗有无效果的参考指标。 5．用于器官移植排异反应的检测 排异反应时血清CRP水平持续升高。 盲傀投闭换旷钨廷凋破笛耻怜拯肆抖祟鹰凶砧胀渺舰柯方杭憋禁昼浦沪淫实验12 透射比浊法测定C反应蛋白实验12 透射比浊法测