分离方法.pptVIP

分 离 方 法 气相色谱法?gas chromatography, GC? 气相色谱与质谱联用?GC-MS? 高效液相色谱 ?high performance liquid chromatography, HPLC? 分离分析中的新技术 毛细管电泳?capillary electrophoresis, CE? 色谱法分离原理 概述及分类 有关的术语 色谱法的基本理论 分离度 定性和定量分析 作业 Simulation of Tswett ‘s experiment 色谱流出曲线可以得到的重要信息 根据色谱峰的个数，可以判断试样中所含组分的最少个数。 根据色谱峰的保留值?或位置?，可以进行定性分析。 根据色谱峰下的面积或峰高，可以进行定量分析。 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据。 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相?和流动?选择是否合适的依据。 组分完全分离的必须条件: 组分的分配系数K必须有差异; K = cs/cm ? cs和cm 分别为组分在固定相和流动相中的浓度? 区域扩宽的速率应小于区域分离的速度; 在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱。 速率理论 作业 P362, 3. 柱效能指标和柱的分离度有什么区别和联系? P363, 18. * * ?表面分析方法? 色谱法?chromatography?与蒸馏，重结晶，溶剂 萃取，化学沉积及电解沉积法一样，也是一种分离技 术。特别适宜分离多组分的试样，是各种分离技术中 效率最高和应用最广的一种方法。 最早创立色谱法的是俄国植物学家茨维特?Tsweet? 将填入玻璃柱内静止不动的一相?固相或液相?称为固定相 自上而下运动的一相?一般是气体，液体或超临界流体?称为流动相 装有固定相的柱子?玻璃或不锈钢?称为色谱柱 色谱的分类 按 照 分 离 过 程 中 相 系 统 的 形 式 和 特 征 柱色谱法 平板色谱法 填充柱色谱法 毛细管色谱法 纸色谱法 薄层色谱法 依据色谱过程中流动相和固定相的物理状态 气相色谱法 液相色谱法 超临界流体色谱法 气固色谱法 气液色谱法 液固色谱法 液液色谱法 按色谱动力学过程 迎头色谱 顶替色谱 洗脱色谱 线性洗脱色谱 非线性洗脱色谱 按所利用的物理化学原理将色谱法分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱，凝胶渗透色谱以及形成络合物色谱等。 色谱法中的有关术语 基线是柱中仅有流动相通过时，检测器响应信号的记录值。 峰高: 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以 h 表示。 保留值: ?1? 死时间tM，不被固定相吸附或溶解的物质 ?2? 保留时间tR，试样从进入开始到柱后出现峰极大值 ?3? 调整保留时间 tR = tR - tM 　　　　　　　　　 ?4? 分配比k，也称容量因子。为组分在固定相和流动相中分配量之比，是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数。 区域宽度:是组分在色谱柱中谱带扩张的函数，反映了色谱操作条件的动力学因素。度量法有:标准偏差?? 半峰宽Y1/2? 基线宽度Y。 色谱法基本理论 塔板理论 n = L/H n 称为理论塔板数，柱效随塔板数增加而增加。 ?1? n 50, 可得到基本对称的峰形曲线。如气相色谱柱的n约为103 ? 106，这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线。 ?2? 当试样进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，仍可获得良好的分离。 ?3? n与半峰宽度及峰底宽的关系式为: n = 5.54 ? ?tR / Y1/2?2 = 16 ? ?tR / Y?2 n有效 = 5.54 ? ?tR? / Y1/2?2 = 16 ? ?tR? / Y?2 L为色谱柱的长度，H称为塔板高度，简称板高。 吸收了塔板理论中板高的概念，并同时考虑影响板高的动力学因素，指出:填充柱的柱效受涡流扩散，分子扩散，传质阻力，流动相的流速等因素的控制，从而较好地解释了影响板高的各种因素。 谱峰展宽的因素 速率理论用随机行走模型解释了色谱流出曲线的形状是高斯曲线，认为可以用方差?2作为色谱峰展宽的指标，进而可以用?12， ?22， ?32 和?42 分别表示涡流扩散，分子扩散，气相传质阻力和液相传质阻力对谱峰展宽的贡献，即 ?2 = ?12 ? ?22 ? ?32 ? ?42 速率理论方程 板高方程: 指出了色谱柱填充的均匀程度，填料粒